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巨核细胞（Megakaryocyte，MK）是骨髓中产生血小板的血细胞，血小板在止血、伤口愈合以及炎症反应中具有重要的作用。然而目前血小板输注完全依赖于健康供者捐献，随着血小板输注需求量的增加，供者来源短缺，血小板难以在体外长期保存，血小板的输注存在巨大的供应缺口。而巨核细胞的多倍体化对于血小板产生非常重要，是高效生成功能性血小板的重要保障。因此解析巨核细胞多倍体化调控机制对于突破血小板再生技术瓶...
研究揭示血小板生成调控新机制
血小板生成 调控新机制
2020/3/31
上海交通大学医学院刘俊岭课题组等首次揭示了酰基甘油激酶（AGK）在巨核细胞分化和血小板生成中的重要作用，并提示靶向AGK与酪氨酸蛋白激酶（JAK2）的相互作用，既可以用于治疗血小板减少症，也可以用于治疗血小板增多症。相关研究成果近日发表于《血液》。
人血小板生成素cDNA转导促进小鼠生长与胰岛素样生长因子相关
血小板生成素 促生长 胰岛素样生长因子 血小板源性生长因子
2007/12/24
摘要 人血小板生成素 ( TPO)基因转导能刺激小鼠生长 .将编码人 TPO的真核表达质粒pc DNA3 h TPO、野生型 pc DNA3 或生理盐水注射小鼠后肢肌肉 ,称量小鼠的体重、器官重 .用半定量 ELISA检测 TPO转导小鼠血清中胰岛素样生长因子 ( IGF) - 、 和血小板源生长因子( PDGF)水平 .结果发现 ,TPO基因转导能促进小鼠的生长 .这种促生长作用与年龄和性别有...
人血小板生成素cDNA转导抑制小鼠移植肉瘤(S180)的生长
血小板生成素 抑制肿瘤 基因治疗 T淋巴细胞
2007/12/24
摘要 以小鼠肉瘤S180为模型 ,研究人血小板生成素 (TPO)在肿瘤基因治疗方面的价值 .在小鼠接种瘤细胞前 2周 ,或在接种肿瘤细胞同时 ,给小鼠注射 10 0 μgTPO表达质粒 (pcDNA3 hTPO) ,在 2周和 4周时肿瘤平均重量明显小于单纯质粒 (pcDNA3)注射和生理盐水对照组 (提前转导组P 0 0 5 ) .当肿瘤移植量为 1× 10 6时 ,2周时肿瘤的重量依次分别为...
TPO内含子Ⅴ可显著增强人血小板生成素基因在乳腺细胞中的表达
人血小板生成素 内含子 基因表达 山羊β-casein
2007/12/20
摘要人血小板生成素（thrombopoietin,TPO）基因组包括6个外显子和5个内含子，内含子在其表达过程中可能扮演着重要作用.为了研究人TPO基因组中不同内含子对TPO表达的影响，构建可在转基因动物乳腺中高水平表达人TPO的乳腺特异性表达质粒.本研究以65 kb的山羊β-casein启动子为调控元件，构建了包括人TPO cDNA(pTPOA)、TPO intronⅠ-TPO cDNA (pT...
血小板生成素基因在NIH/3T3细胞中的表达与调控
Tet-On基因表达系统 基因表达与调控 强力霉素 血小板生成素
2007/12/19
摘要 应用 Tet- On基因表达系统 ,调控血小板生成素 (TPO)基因在 NIH/3T3细胞中的表达时间与水平 .籍脂质体介导的基因转移方法 ,p Tet- On质粒转染 NIH/3T3细胞株 ,得到稳定细胞株NIH/3T3- Tet- On.p TRE/TPO与 p TK- Hyg质粒共转染 NIH/3T3- Tet- On细胞株 ,得到双稳定细胞株 NIH/3T3- Tet- On- TP...
重组人血小板生成素在大肠杆菌中表达的研究
重组人血小板生成素 大肠杆菌 基因表达
2007/12/18
摘要 采用化学法全合成了编码人血小板生成素（ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）成熟肽Ｎ端１５３氨基酸的基因序列，构建基于该合成基因的表达质粒，结果以谷胱甘肽转硫酶－ＴＰＯ１５３（ＧＳＴ－ＴＰＯ１５３）融合蛋白的方式获得了占全菌蛋白４０％的高效表达．进一步采用ＰＣＲ方法分别对ＴＰＯ合成基因及ＴＰＯｃＤＮＡ的翻译起始区（ＴＩＲ）序列进行定点突变，以降低这一区域的Ｇ－Ｃ含量．将突变序列分别插入到ｐＢ...
人血小板生成素全长分子在酵母系统中的分泌表达及活性分析
血小板生成素 毕赤酵母 分泌表达 活性测定
2007/12/18
摘要 外源基因可通过整合型载体被整合到毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）染色体上，获得遗传性稳定分泌表达株．利用酵母信号肽ＭＦα，对该信号肽蛋白酶识别位点的相关序列进行重新设计，使天然人ＴＰＯ成熟肽在毕赤酵母系统中分泌表达成功．表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ进行分析，分子量约为６６ｋＤ处蛋白条带可被ＴＰＯ抗体识别；表达量约为０．１ｇ／Ｌ；Ｎ端氨基酸序列分析结果与设计的一致；表达产物对小鼠...
人血小板生成素重组载体的构建与体外表达
血小板生成素 基因重组 基因转移 基因表达
2007/12/18
摘要 应用基因克隆技术，以人ＴＰＯｃＤＮＡ为目的基因，构建真核细胞表达重组体ＶＲＴＰＯ，藉脂质体将其转染于ＮＩＨ３Ｔ３细胞，应用ＰＣＲ、ＲＴ－ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等技术对其转染及表达情况进行鉴定．结果表明：ＶＲＴＰＯ构建成功，在ＮＩＨ３Ｔ３细胞可表达人ＴＰＯ，为应用人ＴＰＯｃＤＮＡ进行质粒ＤＮＡ骨骼肌直接注射于动物体内的基因治疗研究奠定了基础
血小板生成素基因在体内的表达及对造血祖细胞增殖活性的影响
血小板生成素 基因治疗 ＣＦＵ－ＭＫ 粒细胞及巨噬细胞集落形成单位
2007/12/18
摘要 探讨了从肌肉组织植入的人血小板生成素（ＴＰＯ）基因在小鼠体内的表达规律，以及对造血祖细胞增殖活性的影响．基因在导入后的２４小时内就开始转录，先于血小板、血液ＴＰＯ浓度、及造血祖细胞的变化．所表达的ＴＰＯ在血液中的聚积可持续４周以上．巨核祖细胞，粒系祖细胞都出现２周左右的增殖增长，长于血小板计数的升高，但红系祖细胞的变化不明显．这些结果显示，基因治疗过程中血小板计数等变化源于ＴＰＯ的表达及刺激...
内含子和5’非翻译区对人血小板生成素基因表达的影响
2007/7/25
血小板生成素(thrombopoietin, TPO)是非常重要的造血调控因子，在正常情况下，肝细胞(可能包括肾脏)可持续低水平分泌TPO以有效地维持血清中TPO的浓度(12~61 pg/ml)，保证血小板止血功能[1]。最近，有关TPO基因表达调控的研究取得重要进展，发现了TPO基因组中存在两个特殊的结构特征[2][3]：(1)在TPO基因转录起始位点上游，没有哺乳动物常见的启动子元件，如TAT...
人血小板生成素基因cDNA和基因组DNA的克隆和序列测定
2007/7/25
人血小板生成素(Thrombopoietin, TPO)是新近发现的一个十分重要的造血调控因子，它能特异刺激巨核细胞增殖、分化及血小板成熟，并加速造血前体细胞进入细胞周期。因而在临床上治疗血小板减少和出血中具有重要的应用前景[1]。研究表明，从胎儿到成人，肝脏是TPO产生的主要靶器官，然而在正常的生理状态下，TPO在肝细胞上的表达水平总是很低，这和TPO基因的结构密切相关，也是机体在进化过程中选择...