搜索结果: 1-15 共查到“知识库 兽医学 ELISA”相关记录115条 . 查询时间(0.132 秒)
旨在建立蓝舌病病毒（BTV）血清学ELISA抗体检测方法，本研究以原核表达并纯化的BTV NS4重组蛋白为包被抗原，通过反应条件优化，建立了一种BTV重组NS4蛋白的间接ELISA抗体检测方法。SDS-PAGE结果显示，获得大小约52 ku的NS4重组融合蛋白，主要在上清中存在，Western blot显示，纯化后的重组蛋白具有良好的抗原性。通过方阵试验进行了ELISA反应条件优化，确定了重组蛋白...
本研究旨在建立针对小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）H蛋白抗体的iELISA检测方法。以筛选的H蛋白B细胞表位为基础，选择反应原性较好的4个抗原表位肽串联后合成作为包被抗原，优化各步反应条件及筛选各种缓冲液，并确定检测临界值。经优化后，多表位抗原肽的最佳包被量为1.5×10-6 μg·孔-1，血清临界稀释度为1：100，酶标二抗最佳稀释度为...
1种检测弓形虫急性感染的夹心ELISA方法
弓形虫急性感染 GRA1单克隆抗体 循环抗原 双抗体夹心ELISA
2021/3/8
弓形虫（Toxoplasma gondii）是一种人畜共患机会性致病原虫，其急性感染可导致宿主产生明显的临床症状和严重的病理损伤。弓形虫致密颗粒蛋白1（dense granuleprotein 1，GRA1）是一种良好的诊断抗原，也是弓形虫急性感染的标志物循环抗原（circulating antigen，CAg）的重要组分。本研究利用TgGRA1单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA方法，为急性弓形虫...
旨在对副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，HPS）的黏附素蛋白（autotransporter passenger domain，Apd）ELISA抗体检测方法进行参数优化、临界值确定和应用评价，获得性能稳定的副猪嗜血杆菌病抗体检测试剂盒。首先通过猪的免疫攻毒试验获得HPS阴、阳性对照血清，优化Apd-ELISA的反应参数；然后用背景确认的阴、阳性血清确定其临界值，并对封闭液及...
猪瘟疫苗免疫是我国猪瘟防控的核心，猪瘟病毒抗体ELISA检测是进行免疫效果评价的最常用手段。中国兽医药品监察所国家/OIE猪瘟参考实验室（以下简称：参考实验室）承担了国家认证认可监督管理委员会（以下简称“认监委”）组织的A类能力验证项目“猪瘟诊断检测技术”（CNCA-19-A01），全面考察和评价我国动物疫病检测机构对猪瘟病毒抗体的检测能力。参考实验室负责制备检测样品，并进行随机编号。向每个参试实...
猪戊型肝炎病毒血清抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
猪戊型肝炎病毒 间接ELISA 抗体 ORF2蛋白
2019/1/16
由于猪戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）可跨种属感染人，因此，猪群中猪HEV感染的监测对于该病的防控和公共卫生都具有重要的意义。本试验旨在建立一种检测猪HEV抗体的间接ELISA方法，以原核表达纯化截短的猪HEV衣壳蛋白为包被抗原，优化条件，确定最佳试验条件，并分析该方法的敏感性、特异性、重复性，以及与商品化试剂盒的符合率，评价其临床应用价值。SDS-PAGE和Wester...
一种检测乙型脑炎病毒抗体阻断ELISA的建立及其初步应用
日本脑炎病毒 囊膜蛋白 酶标单抗 阻断ELISA
2019/1/16
流行性乙型脑炎是由日本脑炎病毒（JEV）引起的蚊媒传播人畜共患传染病，严重危害人类和猪、马等动物的健康。为建立检测多种动物血清中JEV抗体的ELISA，应用重组囊膜蛋白和辣根过氧化物酶标记的JEV单克隆抗体建立了检测JEV抗体的阻断ELISA。结果显示：通过对100份JEV抗体阴性猪血清的检测结果进行统计学分析，确定阻断ELISA的判定标准：阻断率（PI）≥34%时判定为阳性，PI≤25%时判定为...
流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立
流行性出血病病毒 多克隆抗体 竞争 ELISA
2018/7/26
为能简便、快速地进行流行性出血病病毒（epizootic haemorrhagic disease virus，EHDV）抗体监测，采用纯化的6型EHDV抗原包被ELISA板，以豚鼠抗EHDV-2型多克隆抗体作为竞争抗体，建立了检测EHDV群特异性抗体的竞争ELISA（C-ELISA）方法。结果显示：抗原最佳包被浓度为5.12 μg·mL-1（1：10 000），竞争抗体最佳稀释倍数为1：10 0...
流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立
流行性出血病病毒 多克隆抗体 竞争 ELISA
2019/1/15
为能简便、快速地进行流行性出血病病毒（epizootic haemorrhagic disease virus，EHDV）抗体监测，采用纯化的6型EHDV抗原包被ELISA板，以豚鼠抗EHDV-2型多克隆抗体作为竞争抗体，建立了检测EHDV群特异性抗体的竞争ELISA（C-ELISA）方法。结果显示：抗原最佳包被浓度为5.12 μg·mL-1（1：10 000），竞争抗体最佳稀释倍数为1：10 0...
旨在建立鸭坦布苏病毒（DTMUV）的特异性血清学诊断方法。本研究以纯化的单克隆抗体1A5为固相筛选分子，利用噬菌体展示技术鉴定DTMUV囊膜（E）蛋白的特异性抗原表位，并利用DNAStar分析抗原表位序列在DTMUV中保守性和与其他黄病毒的E蛋白相应位点的氨基酸序列相似性。结果成功筛选到DTMUV E蛋白的一个线性抗原表位87YAEYI91，该抗原表位在DTMUV中具有高度的保守性，无氨基酸位点差...
猪鼻支原体血清抗体间接ELISA检测方法的建立
间接ELISA 猪鼻支原体 血清学诊断 Vlp
2018/4/2
猪鼻支原体是猪体内的一种常在菌，可引发猪的多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、心包炎等炎症。由于猪鼻支原体与猪其他支原体有较高的交叉反应，目前并没有特异性的血清学诊断方法的报道。本试验以建立猪鼻支原体特异性ELISA检测方法为目的，将猪鼻支原体的表面可变脂蛋白Vlp的特定肽段作为包被抗原，优化该方法检测条件，最终确定：其抗原的最佳包被浓度为0.312 5 μg·mL-1；一抗的最佳稀释度为1∶100，作用...
马泰勒虫裂殖子表面抗原1（EMA-1）是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法，笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物，将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上，构建pGEX-4T-1/EMA1重组质粒，转化至BL21（DE3）中，经IPTG诱导得到EMA-1融合蛋白，切胶纯化后作为包被抗原建立检测马泰勒虫抗体的rELISA...
山羊副流感病毒3型N蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
山羊副流感病毒3型 N蛋白 原核表达 间接ELISA
2017/3/14
山羊副流感病毒3型可引起山羊呼吸道疾病，与支原体、细菌等混合感染引起广泛的发病与死亡，笔者拟通过建立基于N蛋白的间接ELISA抗体检测方法用于该病的监测。设计引物扩增目的基因N，克隆到质粒pET32a(+)上，构建重组质粒pET32a-N，并转化至大肠杆菌BL21中，IPTG诱导表达重组N蛋白并鉴定。通过条件优化建立ELISA抗体检测方法，并检测临床样品与HI试验进行比较。本试验成功构建重组质粒，...
坦布苏病毒NS1蛋白的表达及ELISA检测方法的建立
鸭坦布苏病毒 NS1蛋白 间接ELISA 检测方法
2016/5/24
为了建立坦布苏病毒（TMUV）感染鸭群的抗体检测方法，以TMUV NS1的原核表达蛋白质作为包被抗原，建立了间接ELISA方法，并对该方法进行了检测条件的优化。将TMUV NS1全基因序列克隆至pET-28a(+)，利用BL21（DE3）表达NS1蛋白，纯化后其质量浓度为4.16 μg•μL－1。通过方阵试验，确定了NS1蛋白的最佳包被质量浓度是100 ng•孔-1，检测血...