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搜索结果: 1-12 共查到兽医学 缺失株相关记录12条 . 查询时间(0.102 秒)
potD基因编码的蛋白质作为转运体蛋白,负责多胺的结合和转运,为细胞的正常生长提供必需因子,已在多种病原菌中鉴定为毒力相关因子,但在副猪嗜血杆菌中的作用还不清楚。利用自然转化法构建potD缺失株SC1401ΔpotD::kan,再比较亲本株和缺失株的生长特性、自凝集活性、生物被膜形成能力、抗血清杀菌能力以及对小鼠的致病力。结果显示potD基因的缺失不影响副猪嗜血杆菌的生长、自凝集活性和生物被膜形成...
为了探索σ因子RpoN在鼠伤寒沙门菌生物被膜形成过程中的作用,对两株生物被膜形成能力较强的鼠伤寒沙门菌利用Red同源重组系统构建rpoN基因缺失株,利用原核表达载体构建回复株;比较野生株、缺失株和回复株的生物被膜形成能力和对环境应激抵抗力的差异,并通过建立的csgA 和bcsA基因实时定量PCR方法检测编码生物被膜成分基因的表达差异。结果显示,与野生株相比,△rpoN缺失株生物被膜形成能力增强,主...
lgtF基因编码的葡萄糖基转移酶在脂寡糖(LOS)的合成过程中负责增加一个葡萄糖合成庚糖I,在部分革兰阴性菌中是重要的毒力相关基因,但lgtF基因在副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)中的作用还不清楚。本研究利用遗传操作方法构建HPS SC096的lgtF基因缺失株(ΔlgtF)。通过热酚法分别提取缺失株与野生株的LOS,将提取的LOS进行SDS-PAGE和银染。比较缺...
拟构建单核细胞增生李斯特菌(LM)非编码RNA ril87基因缺失株,对其进行分子鉴定,分析rli87基因缺失对LM生长的影响。用融合PCR方法构建LM-SB5 rli87基因缺失突变体,并构建pKSV7-Δrli87穿梭载体,将其转化入LM-SB5感受态细胞,利用温度(42 ℃)和氯霉素(10 μg•mL-1)的抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组菌进行分子鉴定,测定缺失株与母源...
为了确定伪狂犬病病毒(PRV)gN基因的功能,以PRV-JSZ双基因缺失株rPRV-gE-/TK-和疫苗株Bartha K61为亲本株,通过同源重组技术构建这两种病毒的gN缺失株。PCR扩增鉴定和序列分析结果显示成功获得了gN缺失株rPRV-gE-/TK-/gN-和rPRV-Ba-gN-。与亲本株相比,rPRV-gE-/TK-/gN-在PK15细胞上早期增殖速度较慢,但效价无明显变化;rPRV-B...
为了构建无报告基因的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE/TK双缺失株,以PRV-JSZ株为亲本毒株,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,先构建出带有loxP位点的rPRV-gE-/GFP,通过Cre重组酶处理后,获得剔除EGFP的gE单缺失株rPRV-gE-;再以rPRV-gE-为母本,以相同方法构建gE/TK双缺失株rPRV-gE-/TK-。荧光检测和PCR结果显示成功构建了gE单缺失株和gE/...
【目的】WboA基因编码光滑型布鲁氏菌脂多糖(LPS)O-侧链合成必须的糖基转移酶,该基因的缺失或破坏会影响布鲁氏菌光滑型表型的形成。本研究拟构建WboA基因缺失的重组粗糙型布鲁氏菌,以使布鲁氏菌弱毒疫苗与野毒株布鲁氏菌感染相区分。【方法】以猪源光滑型布鲁氏菌S2株为研究对象,通过同源重组将氯霉素抗性基因(Cmr)完全替代S2株的WboA基因,获得重组粗糙型布鲁氏菌rS2-WboA株。【结果】rS...
【目的】猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)为一种重要的人兽共患病病原,次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)为SS2新近鉴定的一个蛋白,本文旨在体外构建基因缺失株明确IMPDH与SS2致病力的相关性。【方法】选用自杀性质粒,通过体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,电转化进入SS2,经同源重组,获得impdh基因缺失株。通过接种不同敏感动物,明确缺失株致病力的变化...
1基因缺失疫苗株的构建:首次在国内运用缺失、重组等基因工程技术,成功地构建了PRV Fa株TK基因、PRV Fa Gi-/gp63-基因、PRV Fa Gi-/gp63-/LacZ基因、PRV Fa TK-/Gi-/gp63-/LacZ基因等系列缺失株;动物实验表明这些基因缺失株均为优秀的疫苗候选株,同时用作载体构建动物活载体疫苗不仅具有痘苗病毒、腺病毒等病毒载体的优点,与人类疾病无关,具有神经...
伪狂犬病是当今危害全球养猪业最严重的传染病之一,给全球养猪业造成巨大的经济损失。该病在中国广泛存在,并严重发病,损失巨大。针对这一情况,“九五”期间我们承担了中国生物工程开发中心生物技术攻关项目“伪狂犬病基因缺失疫苗研制”专题。用自己从湖北省发病猪病料中分离、鉴定、筛选到在细胞上增殖滴度高、免疫原性好的伪狂犬病毒鄂A地方标准毒株为亲本,采用病毒分子生物学与基因工程的方法与原理,构建了鄂A株TK-/...
伪狂犬病病毒Fa株gI和gp63基因缺失株的构建。
通过自杀性质粒介导的等位交换技术构建猪霍乱沙门氏菌C78-1株的crp基因缺失株,并对其生物学特性进行初步研究。首先以猪霍乱沙门氏菌C78-1基因组为模板进行PCR,扩增出crp基因上下游片段(1 048和1 743 bp),并分别将其克隆入自杀性质粒pRE112上,构建含缺失320 bp crp基因的重组自杀性质粒pREΔcrp。运用重组自杀性质粒介导的等位交换技术,两步法筛选C78-1的Δcr...

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