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该研究利用分子标记技术(PCR-RFLPs、微卫星DNA)研究了肉牛生长激素基因、微卫星TGLA44位点的多态性及其与主要生产性能间的关系，以及利用单核苷酸多态性(SNPs)分析技术对双肌基因(MSTN)进行了鉴定、分型研究。该研究对加快肉牛遗传进展、缩短世代间隔，以及进行品种鉴定、提高肉牛育种水平具有重要的理论和应用价值，居国际先进水平。
CpG DNA对鸡传染性喉气管炎病毒DNA疫苗免疫效果的影响。
CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的乳腺炎大鼠的保护研究
乳腺炎 大鼠 模型 金黄色葡萄球菌
2008/10/22
【目的】建立金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）感染的大鼠乳腺炎模型，并观察CpG-DNA对乳腺的保护作用。【方法】18只雌鼠分3组(n=6)，产后72h分别灌注磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution，PBS）（C组）、2×105CFU•ml-1（L组）和2×1012CFU•ml-1 (H组)金葡菌到第四对乳腺内，24 h处...
表达H5亚型禽流感病毒HA基因的DNA疫苗免疫保护效力研究
禽流感病毒 血凝素基因 DNA疫苗 免疫保护效力
2008/10/20
表达高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1) [GD/1/96(H5N1)]HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA5具有良好的免疫保护性,为了将其开发并应用于实际,对其免疫保护效力进行了进一步的研究。结果表明,用10、40、70、100和150g pCIHA5和油苗1次免疫后,其免疫保护率分别为12.5%(1/8)、58.3%(7/12)、72.7%(8/11)...
表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果
禽流感 H5亚型 鸡β－actin启动子 DNA疫苗 免疫保护
2008/10/20
【目的】将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS，构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5，以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。【方法】将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染29...
利用微卫星DNA多态性预测引进肉用绵羊品种杂种优势
绵羊 微卫星DNA 遗传多态性 杂种优势
2008/9/19
【目的】利用微卫星DNA在不同绵羊群体中的多态性预测引进肉用绵羊品种与小尾寒羊的杂种优势。【方法】利用5个微卫星基因座对4个国外引进肉羊品种及小尾寒羊5个群体的等位基因频率、群体多态信息含量、有效等位基因数、杂合度和遗传距离进行了遗传检测，并测定4个引进肉羊与小尾寒的杂交效果。【结果】5个微卫星基因座在白头萨福克、黑头萨福克、道赛特、得克赛儿及小尾寒羊5个群体中存在多态性，可以用于绵羊遗传多样性的...
捻转血矛线虫DNA疫苗的构建及山羊免疫保护性试验
山羊 捻转血矛线虫 H11 DNA疫苗
2008/9/17
【目的】构建捻转血矛线虫DNA疫苗，并研究该疫苗对山羊的免疫保护效果。【方法】将捻转血矛线虫重要保护性抗原H11的编码基因分H11-1、H11-2和H11-3三部分，分别亚克隆到基因疫苗载体pcDNA4/His Max C中，用酶切反应、序列测定等方法鉴定重组疫苗。将纯化的DNA疫苗肌肉注射山羊后，用RT-PCR、Western blotting和ELISA方法检测疫苗在山羊体内的转录、翻译和诱导...
【目的】探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）自杀性DNA疫苗的免疫效果。【方法】将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游，获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。【结果】Western blot检测证实ORF5和ORF6基因获得正确表达，并且所表达的GP5和M蛋白可以形成异源二聚体。将pSFV-56免疫Balb/c...
猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因对猪的DNA免疫
猪繁殖与呼吸综合征病毒 DNA重组质粒 细胞因子 免疫反应
2008/8/22
【目的】检测PRRSV GP5 DNA重组质粒在猪体诱导的免疫反应以及细胞因子的佐剂效应。【方法】将表达PRRSV GP5的DNA重组质粒与表达3种细胞因子的重组质粒联合免疫SPF猪，经3次免疫后人工感染PRRSV，检测体液免疫、细胞免疫以及攻毒保护性反应。【结果】重组质粒pCI-GP5可诱导免疫猪产生中和抗体，效价达1:19.2，并可诱导机体产生较强的细胞免疫，攻毒后组织中PRRSV核酸的检出率...
猪血液和肌肉组织DNA甲基化含量的测定
高效液相色谱 DNA 甲基化 猪
2008/8/22
通过测定纯种亲本大白猪、长白猪、梅山猪及其正反交大白猪×长白猪、长白猪×大白猪、大白猪×梅山猪和梅山猪×大白猪等杂种猪血液和肌肉组织DNA甲基化含量，分别比较基于不同杂交组合和不同组织，亲本与子代之间在DNA甲基化含量上的差异,为揭示杂种优势的分子机制提供依据。【方法】采用高效液相色谱法测定血液和组织中甲基化含量。【结果】经过测定及计算，163份肌肉组织样平均甲基化含量为16.92%；182份血液...
牛分枝杆菌三价组合及融合DNA疫苗免疫效果的研究
牛分枝杆菌 融合DNA疫苗 多价DNA疫苗
2008/8/21
分泌性蛋白Ag85B、MPB64和ESAT-6为Mycobacterium bovis的主要保护性抗原，在诱导机体免疫反应和抵抗感染中发挥重要作用。本研究以pcDNA3.1(+)为载体，构建了由上述3种抗原基因构成的不同疫苗：3基因融合（pcDNA－MPB64－Ag85B－ESAT-6，pCMAE）DNA疫苗和三价（pcDNA－Ag85B+pcDNA－MPB64+pcDNA－ESAT-6）DNA疫...
猪肺表面活性蛋白A的DNA全序列克隆与生物信息学分析
猪 SP-A基因 全序列克隆 生物信息学分析
2008/8/21
猪肺表面活性蛋白A（Porcine surfactant protein A，SP-A）是猪肺泡表面活性蛋白中含量最多、最先被发现具有炎症免疫调节功能的表面活性蛋白。本研究利用比较基因组学方法，设计了6对引物进行PCR扩增，克隆测序后进行拼接，获得了长为4 037 bp猪SP-A 基因的全序列(gi: DQ985806)。经生物信息学分析，此序列包含了猪SP-A基因启动子区，含有1个747 bp的...
猪、山羊微卫星DNA分子的研究
遗传多样性 微卫星标记 遗传定位
2008/7/3
该研究构建了适用于猪短串联重复DNA顺序（根据英文又直译为微卫星DNA，以下简称微卫星DNA）筛选的基因组部分小插入片段文库，对筛选到的5个阳性克隆进行了DNA顺序测定，暂定名为HAU01、HAU02、HAU03、HAU04和HAU05。将猪微卫星DNA SW60、SW605定位于12q13-q15和12q15，并初步构建了SW60、SW605和GH（生长激素基因）相互之间的物理框架图。率先将单精...
猪口蹄疫、伪狂犬病、猪瘟三联DNA疫苗
DNA疫苗 伪狂犬病 猪瘟 猪口蹄疫
2008/6/26
该项目研究构建了猪口蹄疫、伪狂犬病和猪瘟三联DNA疫苗pVFPC及含GM-CSFcDNA的佐剂质粒pVGM，现经农业部审批后已获准在江苏进行中间试验。该项目开发的DNA疫苗是一种有别于传统灭活苗和减毒疫苗的新的疫苗形式，它克服了传统疫苗的缺点，不但可以刺激机体产生体液免疫，而且可以产生较强的细胞免疫。该产品制备简单、成本低廉、使用方便，免疫保护作用维持时间长，未发现有任何毒副作用。