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猪MITF-M的转录调控分析
猪 MITF-M 转录活性 KLF4
2019/1/17
旨在研究猪MITF-M（microphthalmia associated transcription factor M）转录调控区域活性以及验证重要转录因子。以猪DNA为模板，利用PCR扩增获得MITF-M转录调控区，基因克隆得到5'端缺失重组载体，运用双荧光素酶报告基因试验进行转录活性分析，再通过干扰RNA试验验证重要转录因子。本试验成功克隆得到MITF-M 6 414 bp的转录调控区域；构...
促肾上腺皮质激素对母猪肝中葡萄糖代谢相关酶转录表达及活性的影响
ACTH 肝 糖代谢 母猪
2019/1/17
旨在研究促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone，ACTH）对母猪肝中葡萄糖代谢相关酶转录表达及活性的影响，以探讨应激状态下肝调节血糖水平的分子机制。本研究选取9头健康经产断奶苏淮母猪，随机分成处理组（5头）和对照组（4头）。对处理组母猪注射外源ACTH，对照组母猪注射生理盐水；每天处理3次，连续7 d。试验期间每天采集母猪血液；试验结束后，取母猪肝组织。利用放射免...
本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒（BCoV）的RT-PCR方法，并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测。选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物，通过反应条件和体系优化，建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。结果显示：所建方法特异性和重复性好，灵敏性达到1×10-2 pg·μL-1；该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果，优于比较的两种以BCoV ...
硫酸小檗碱对猪轮状病毒感染的IPEC-J2中TGF-β1、EGFR、EGF、IGF1 mRNA表达的影响
硫酸小檗碱 仔猪肠黏膜上皮细胞 猪轮状病毒 实时荧光定量PCR TGF-β1 EGFR EGF IGF1
2019/1/16
利用猪轮状病毒（PoRV）感染仔猪肠黏膜上皮细胞（IPEC-J2）建立损伤模型，研究硫酸小檗碱（BS）对PoRV感染的IPEC-J2中TGF-β1、EGFR、EGF、IGF1基因mRNA表达的影响。通过构建目的基因和内参基因的重组质粒，绘制荧光标准曲线，采用实时荧光定量PCR法测定BS对PoRV感染的IPEC-J2中TGF-β1、EGFR、EGF、IGF1 mRNA表达的影响。结果显示：PoRV能...
旨在比较牦牛和柴达木黄牛低氧通气反应（HVR）特征及颈动脉体（CB）中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）含量。选择生活在海拔3 200 m临床健康的成年牦牛和柴达木黄牛进行13.9% O2低氧（模拟海拔6 000 m）通气反应；采用荧光定量PCR、酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法和免疫组织化学方法对海拔3 200 m牦牛、柴达木黄牛及模拟海拔6 000 m时CB中的NOS mRNA和蛋...
拟阐明雌激素调节十二指肠运动的作用规律，并筛选和建立其浓度与十二指肠肌电活动监测指标的数学模型。通过构建试验家兔的卵巢摘除动物模型和电极埋置动物模型，肌注不同剂量的苯甲酸雌二醇，采用BL-420F生物机能试验系统分别记录各试验组家兔十二指肠肌电活动变化，并对结果进行统计分析，结合对各监测指标的函数拟合精度分析选择并构建苯甲酸雌二醇与十二指肠肌电活动监测指标最优的数学模型。结果表明，十二指肠肌电的振...
北京地区猪圆环病毒3型感染的检测及基因组遗传变异分析
猪圆环病毒3型 全基因 遗传分析
2019/1/16
旨在了解北京地区猪圆环病毒3型（porcine circovirus type 3，PCV3）的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律，为PCV3的防控提供参考依据。采集北京地区规模化养殖场73份临床表现为繁殖障碍和呼吸系统疾病的组织样品，对其中的PCV3进行检测和测序。根据PCV3全基因组序列设计3对特异性引物，从患PDNS的断奶仔猪内脏组织中扩增PCV3全基因序列片段，克隆到pMD19-T载体...
10种猪常见病毒基因芯片检测方法的建立及初步应用
猪病毒 PCR 基因芯片 检测
2019/1/16
旨在建立一种可同步检测猪10种常见疫病病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）、猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）、猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）、猪圆环病毒2型（porcine circovirus 2，PCV2）、猪...
猪戊型肝炎病毒血清抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
猪戊型肝炎病毒 间接ELISA 抗体 ORF2蛋白
2019/1/16
由于猪戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）可跨种属感染人，因此，猪群中猪HEV感染的监测对于该病的防控和公共卫生都具有重要的意义。本试验旨在建立一种检测猪HEV抗体的间接ELISA方法，以原核表达纯化截短的猪HEV衣壳蛋白为包被抗原，优化条件，确定最佳试验条件，并分析该方法的敏感性、特异性、重复性，以及与商品化试剂盒的符合率，评价其临床应用价值。SDS-PAGE和Wester...
不同来源的3株牛病毒性腹泻病毒对小鼠的致病性分析
牛病毒性腹泻病毒 致病性 BALB/c小鼠 感染
2019/1/16
为分析牛病毒性腹泻病毒（BVDV）对小鼠的致病性，选取BALB/c小鼠为试验动物，攻毒组通过腹腔注射接种不同来源的3株牦牛源BVDV1-DJ2、BVDV1-Z6和OregonC24V毒株，对照组接种DMEM培养基。分别于接种后第5、7、10天收集小鼠血液和组织，并通过血常规、病理组织学、荧光定量PCR等方法对病毒感染小鼠的致病性进行研究。结果显示：攻毒后，Z6组小鼠表现的临床症状较DJ2组严重；攻...
牛流行热病毒分离株HN1/2012的全基因组序列测定及演化分析
牛流行热病毒 全基因组序列 演化分析
2019/1/16
旨在解析我国牛流行热病毒（BEFV）分离株HN1/2012的基因组特征，为阐明我国BEFV毒株的演化规律提供数据。根据GenBank中收录的BEFV毒株的全基因组信息，设计引物，以RT-PCR扩增11段相互部分重叠的DNA片段，克隆至pGEM T-easy载体，分别进行测序，利用DNAStar软件进行序列拼接获得HN1/2012株的全基因组序列。根据BEFV编码基因的转录起始（TI）和转录终止/多...
鸭瘟病毒新近分离毒株部分基因变异分析
鸭瘟病毒 分离鉴定 分子特征
2019/1/16
旨在研究鸭群中新流行的鸭瘟病毒（duck plaque virus，DPV）感染状况及其分子特征。本研究对2016-2017年福建不同地区疑似感染DPV的发病鸭组织样品进行了检测、病毒分离和部分基因的序列分析。从临床样品中分离获得24株DPV，发现确诊感染DPV鸭的日龄存在品种差异性，其中半番鸭和番鸭感染DPV的日龄中位值分别为90和88 d，而麻鸭感染DPV的日龄中位值为287 d。对DPV U...
H9N2亚型禽流感持续在我国鸡群中广泛流行，为了明确2017年山东省聊城市一肉鸡场H9N2亚型禽流感病毒的分子演化和抗原变异情况，对6株H9N2亚型病毒分离株进行了基因扩增、序列测定和进化分析，并分别使用病毒分离株和疫苗株抗原进行血凝抑制试验，比较免疫鸡血清的抗体效价差异。结果如下：NCBI Blastn分析表明，与各分离株基因同源性最高的序列分别来源于山东、河北、上海、江苏、浙江、江西、湖南、广...
旨在研究不同浓度氨气和硫化氢应激对肉羊免疫及抗氧化功能的影响。本研究选用8只青年母羊，随机分为两组，每组4个重复，两组羊在动物营养代谢环控舱A舱、B舱内循环进行如下处理，A舱：对照（0~6 d）：3 mg·m-3NH3+0 mg·m-3H2S；处理1（8~13 d）：20 mg·m-3NH3+8 mg·m-3H2S；处理2（15~20 d）：40 mg·m-3NH3+8 mg·m-3H2S；处理3...