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搜索结果: 1-15 共查到病理学 转染相关记录29条 . 查询时间(0.109 秒)
克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。 方法 采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾HEK 293细胞,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。 结果 实时定量PCR证实TRAF3IP...
目的:研究adiponectin对C2C12肌细胞糖原合成和葡萄糖氧化的影响。 方法: 用阳离子脂质体介导转染和随后G418筛选建立稳定转染小鼠adiponectin cDNA真核表达质粒(pcDNA3.0-mad)及空载pcDNA3.0的C2C12细胞株并鉴定。C2C12肌细胞糖代谢实验分对照组、空载体组和pcDNA3.0-mad(mad)组共3组进行,每组又分 0、0.5、5、100 nmol...
目的:研究RARβ受体基因转染后,全反式维甲酸(ATRA)对低维甲酸反应性胃癌细胞系MKN-45细胞凋亡的影响和可能机制。 方法: 脂质体介导真核表达载体pCMV-script-RARβ转染MKN-45细胞株,筛选得到阳性克隆,Western blotting鉴定转染成功后给予RARβ受体相应配体ATRA,MTT法测定细胞增殖水平,分别采用Northern blotting、Western blo...
目的:HCAP1基因定位于人类染色体17p13.3,此区域在多种肿瘤组织呈杂合性缺失,本研究旨在探讨HCAP1外源基因产物对B淋巴瘤细胞系Raji细胞增殖的作用。 方法: 应用脂质体介导法,将HCAP1基因转染Raji细胞,经G418筛选、获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞,用台盼蓝活细胞计数、绘制生长曲线、软琼脂集落培养及BrdU(5溴-2'脱氧尿嘧啶)标记法,观察HCAP1基因产物对Raji...
目的:构建含有T细胞转录因子T-bet(T-box expressed in T cells)的重组腺病毒Ad.T-bet,并诱导Th1型淋巴细胞分化。 方法: 采用RT-PCR的方法从健康人外周血淋巴细胞的总RNA中克隆T-bet基因,亚克隆入腺病毒穿梭载体成为pAdtrack-CMV.T-bet,与腺病毒基因组载体pAdeasy-1同源重组为pAd.T-bet,经Pac I酶切后转染293细胞...
目的:观察腺病毒载体转染骨髓间质干细胞(BMSCs)的有效性和外源性基因表达的时相性。 方法: 体外培养大鼠骨髓间质干细胞,用已构建好的Ad5-CMV- GFP真核载体分别转染培养的第3代(P3)及第8代(P8)BMSCs。流式细胞仪检测转染后第2、4、7及10 d绿色荧光蛋白(GFP)的表达率。RT-PCR、Western杂交等方法检测腺病毒受体(CAR)在各代BMSCs中的基因和蛋白质的表达。...
目的:观察局部转染血管内皮生长因子165(VEGF165)基因对损伤动脉内膜增生的影响并探讨可能机制。 方法: 采用显微外科手术方法,建立兔右髂外动脉损伤模型。将105只新西兰大白兔随机分为3组,每组35只。A组为生理盐水对照组,B组为脂质体介导的pBudCE4.1转染组,C组为脂质体介导的pBudCE4.1/VEGF165转染组。用微注射器将各种转染液注入损伤的血管壁,每组按实验终点(术后2、3...
目的:探讨野生型p53基因对血管平滑肌细胞(VSMC)的促凋亡作用在构建动脉粥样硬化(As)不稳定斑块动物模型中的价值。方法: 54只雄性新西兰纯种兔用球囊损伤腹主动脉+高脂喂养10周, 于8周末随机分成A组(p53基因组,27只)和B组(LacZ基因组,27只),在腹主动脉斑块形成处分别转染携带野生型p53基因或LacZ基因的重组腺病毒载体;2周后,A组和B组各处死10只,观察斑块的自发破裂情况...
目的:应用基因芯片技术,研究缺氧及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因转染对HepG2细胞基因表达谱的影响。方法: 以常氧对照腺病毒(Ad-GFP)转染组(CC组)为对照组,常氧HIF-1α腺病毒(Ad-HIF)转染组(CH组)、低氧对照腺病毒(Ad-GFP)转染组(HC组)、低氧(2%O2, 24 h) HIF-1α腺病毒(Ad-HIF)转染组(HH组)为实验组,提取HepG2细胞的总RNA,反...
目的:探讨缺氧、复氧条件下,低氧反应元件(HRE)作为氧条件基因表达控制开关,对心肌细胞转染rAAV-HRE9-hVEGF165基因表达的调控作用。方法:分离新生SD大鼠心肌细胞,采用无血清培养,将在HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。实验共分为8组:Ⅰ组(空白对照组):常氧培养 24 h(氧浓度21%);Ⅱ组(缺氧对照组):常氧培养16 h,缺氧8 h(氧浓度1%)...
目的:探讨腺病毒介导血管内皮生长因子165基因(AdVEGF165)转染乳鼠心肌细胞后血管内皮生长因子(VEGF)的表达及移植于大鼠急性心肌梗死(MI)模型后对心功能的影响。方法:体外培养新生大鼠心室肌细胞、标记BrdU、共培养法转染AdVEGF165基因;收集培养液上清,ELISA法检测转染细胞VEGF的表达。结扎同种大鼠前降支建立心肌梗死模型,4周后将心肌梗死大鼠随机分为4组,分别注射移植...
目的:探讨在体转染GSK-3β对tau蛋白在PHF-1位点磷酸化的影响。 方法: 21只大鼠随机分为GSK-3β转染组、空载体组和空白对照组3组:0.1 μg/3 μL GSK-3β-HA质粒和空载体分别注射入大鼠大脑,对照组大鼠不作处理,应用免疫印迹和免疫组织化学检测GSK-3β的表达,并应用磷酸化位点特异性抗体PHF-1检测tau蛋白的磷酸化水平。 结果: 转染48 h后,GSK-3β-HA表...
目的: 分别经气管和静脉途径转染腺病毒载体基因至肺组织,探索不同给药途径对肺组织的转染效率和腺病毒载体转基因治疗的安全性。方法: 分别通过气管内滴入和静脉注射途径向家兔转染携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的腺病毒载体(Ad-GFP 2×109pfu),于第3 d、7 d、14 d、21 d处死动物,荧光显微镜下观察测肺、肝脏、心脏组织GFP表达,HE染色观察组织病理改变。结果: 气管转染组第3 d仅...
目的:应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染肝星状细胞(HSCs),探讨FRNK选择性抑制黏着斑激酶(FAK)磷酸化对FN刺激的HSCs凋亡的影响。方法:在体外培养HSCs,以FN刺激HSCs增殖,采用脂质体介导的方法进行FRNK表达质粒转染。应用膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术、DNA凝胶电泳技术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,Western blot...
目的: 探讨AngⅡ 2型受体(AT2R)基因在体转染对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的抑制作用。方法:大鼠颈动脉球囊损伤后,局部转染AT2R重组腺病毒载体(pAdCMV/AT2R)或空病毒载体(pAd-GFP),于术后7、14和21 d用RT-PCR、免疫组织化学及HE染色方法,进行AT2R、AngⅡ 1型受体(AT1R)、PCNA在颈动脉壁中表达的变化及定量组织形态学分析;免疫荧光双标染色和...

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