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PRL-2基因转染对肝细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响
肝细胞 蛋白质酪氨酸磷酸酶 基因转染 基质金属蛋白酶
2009/8/27
目的:研究PRL-2基因增强肿瘤细胞侵袭及转移能力的机制。 方法:采用脂质体转染的方法将PRL-2基因表达质粒转染至正常永生化肝细胞系CL1中，G418筛选阳性克隆。应用明胶酶谱法检测转染肝细胞分泌MMPs 酶谱变化，Western blotting 及RT-PCR检测转染肝细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的变化。以PRL-2磷酸酯酶特异性抑制剂处理转染细胞，观察抑制PRL-...
FRNK质粒转染抑制肝星状细胞胶原合成
肝星状细胞 黏着斑激酶相关非激酶 胶原 胶原Ⅰ型
2009/8/27
目的：探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）对纤维连接蛋白（FN）刺激的肝星状细胞（HSCs）胶原合成的影响。方法:应用体外细胞培养技术，脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染；采用Western blotting方法测定FRNK蛋白在HSCs的表达，鉴定转染效果；［3H］-Pro掺入法检测HSCs总胶原和Ⅰ型胶原的合成能力。结果:FRNK质粒成功转染HSCs，于转染48 h时FRNK蛋白表达最强（P...
外源DNA转染精子的实验研究
精子 基因载体 脂质体
2008/9/23
背景与目的：探索精子作为外源基因载体的可行性及阳离子脂质体的存在对精子转染率的影响。材料与方法：取性成熟雄性金黄地鼠附睾内精子，采用共培养及脂质体介导两种方法与外源DNA共孵育后，用PCR、Southern blot及荧光原位杂交(FISH)等技术检测外源基因在精子细胞中的存在及存在部位，并对两种方法进行比较分析。结果：金黄地鼠附睾内的活精子具有主动捕获外源基因的能力，荧光原位杂交证明部分外源基因...
脂质体介导外源DNA体外转染金黄地鼠卵母细胞的研究
卵母细胞 脂质体 整合
2008/8/25
背景与目的：研究外源DNA在金黄地鼠卵母细胞染色体上的整合率，探索卵母细胞作为外源基因载体的可行性。材料与方法：在体外，用脂质体包裹外源NF-Luc质粒，将其与金黄地鼠卵母细胞共培养后收获细胞，分别用斑点杂交、Southern杂交以及荧光原位杂交分析检测Luc＋基因在卵母细胞中的整合。结果：Southern杂交分析，在13个样本DNA中发现9个样本有Luc＋基因特异性条带扩增；阳性率为69.2 ％...
摘要 为了更全面地了解nm23-H1在肺癌中发挥转移抑制的机理,用双向凝胶电泳技术比较人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)间蛋白表达的差异.利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)的总蛋白,用图像分析软件比较分析以识别细...
