搜索结果: 1-15 共查到“植物病理学 PCR”相关记录39条 . 查询时间(0.107 秒)
为确定在云南文山地区喜树上发生的疑似丛枝病的病原种类及快速检测喜树丛枝病,本研究利用植原体16S rDNA基因通用引物P1/P7和R16F2n/R16R2对感病喜树总DNA进行常规PCR和巢式PCR扩增、克隆和测序,通过系统进化分析,明确了喜树丛枝植原体属于16SrXXXII组。然后根据喜树丛枝病植原体16S rDNA基因保守区域设计并合成特异性引物和TaqMan探针,制备了喜树丛枝病植原体标准质...
为明确宁夏马铃薯镰刀菌根腐病病原菌种内的遗传差异与亲缘关系，利用ISSR-PCR技术对影响PCR扩增效果的因素和ISSR引物进行优化和筛选，建立适合马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的ISSR-PCR反应体系，并通过ISSR分子标记技术对30株地理来源不同的镰刀菌进行遗传多样性分析。结果显示：马铃薯镰刀菌根腐病病原菌的ISSR-PCR扩增最适引物为807，20 μL反应体系中2×Easy Taq PCR S...
基于TaqMan MGB探针的葡萄茎枯病菌实时荧光PCR检测方法
葡萄茎枯病菌 实时荧光PCR 检测
2020/3/13
葡萄茎枯病菌是我国进境植物检疫性有害生物。带菌植物材料是病害传播的重要载体,准确、灵敏、快速的检测方法是严格执行口岸检疫措施及研究病害防控措施的有力工具。根据葡萄茎枯病菌及其近似种的细胞骨架蛋白(Actin)基因序列差异,设计并合成1对引物和1条特异性TaqMan-MGB探针,建立了葡萄茎枯病菌的实时荧光PCR检测方法。通过对反应体系的优化,确定了葡萄茎枯病菌的实时荧光PCR最佳反应条件:引物终浓...
‘阳光玫瑰’葡萄病毒小RNA测序鉴定及RT-PCR检测
阳光玫瑰 小RNA测序 葡萄病毒 RT-PCR
2019/12/25
‘阳光玫瑰’是我国从日本引进的葡萄优良品种。为了明确我国‘阳光玫瑰’葡萄病毒病的病原,本研究采用小RNA测序技术对2株显症和无症状的‘阳光玫瑰’葡萄样品进行病毒鉴定结果显示:显症样品中测定到8种病毒,其中包含葡萄蚕豆萎蔫病毒(Grapevine fabavirus, GFabV)和灰比诺葡萄病毒(Grapevine Pinot gris virus, GPGV);无症状样品中测定到3种葡萄病毒。对...
应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B
葡萄 葡萄病毒B 实时荧光定量RT-PCR 常规RT-PCR
2019/11/18
本研究建立了葡萄病毒B的 SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测技术。该技术标准曲线扩增效率102.4%,相关系数0.999,最低检测限达10-4倍稀释cDNA,灵敏度为常规RT-PCR的100倍。重复性试验组内和组间变异系数分别为0.00%~0.65%和0.02%~2.00%,表明检测稳定性好。该技术对田间葡萄样品检测适用范围广,对枝条和老叶柄检测效果最好,冬季枝条...
通过URP(Universal Rice Primers)-PCR分析尖孢镰孢菌苦瓜专化型基因组DNA扩增片段多态性,筛选检测尖孢镰孢菌苦瓜专化型的特异性引物,并建立了基于该引物的PCR检测方法。结果表明,特异性引物为FOMM-SPF/FOMM-SPR, PCR检测体系为25 SymbolmAL,包括2SymboltB Green Taq Master Mix 12.5 SymbolmAL,10 ...
猕猴桃植株中柑橘叶斑驳病毒实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用
猕猴桃 柑橘叶斑驳病毒 实时荧光定量PCR
2019/11/22
柑橘叶斑驳病毒(Citrus leaf blotch virus, CLBV)在陕西省栽培猕猴桃中发生普遍。为监测CLBV发生情况,本研究建立了CLBV的实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测方法。该方法特异性强,可准确检测目的病毒,标准曲线斜率为-3.378,决定系数R2=...
稻粒黑粉病菌实时荧光定量PCR内参基因筛选
稻粒黑粉病菌 实时荧光定量PCR 内参基因
2020/2/12
实时荧光定量PCR是一种被广泛应用于基因表达研究的分子技术,内参基因的选择对试验结果的可靠性起重要作用。稻粒黑粉病是一种全球性水稻真菌病害,目前没有关于稻粒黑粉病菌内参基因的报道。本文选择6个常用内参基因,对其在稻粒黑粉病菌不同菌株、不同生活史阶段和不同浓度Basta处理3组生物学样本中的稳定性进行比较分析。经geNorm3.5、NormFinder0.953及BestKeeper1.0软件综合评...
3种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立及应用
Sweet potato virus multiplex RT-PCR Sweet potato feathery mottle virus Sweet potato latent virus Sweet potato virus 2
2020/2/12
To effectively monitor the occurrence of major sweet potato viruses, the multiplex RT-PCR assay was established for detection of Sweet potato feathery mottle virus (SPFMV), Sweet potato latent virus (...
根据番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus, ToCV)热激蛋白70(Hsp70)的基因序列,设计ToCV实时荧光定量PCR特异引物。利用重组质粒ToCV-1为标准品建立SYBR Green I实时荧光定量方法。针对引物浓度、退火温度、特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行系列优化。结果表明,最适退火温度为63℃,最适引物浓度为0.3 μmol·L-1。熔解曲线为特异性单峰,表明其...
长岭发垫刃线虫(Trichotylenchus changlingensis)双重PCR检测方法研究
Trichotylenchus changlingensis duplex PCR specific primer molecular diagnosis
2020/2/14
In order to simply, rapidly and accurately identify Trichotylenchus changlingensis, the ITS region of 8 different populations of T. changlingensis was amplified by PCR using a pair of universal primer...
由西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)引起的细菌性果斑病是一种毁灭性的种传病害,可为害多种葫芦科作物并造成重大经济损失。该病原菌为检疫性有害生物,种子带菌是田间病害发生的最重要初侵染来源,因此,种子健康检测成为病害综合防控过程中的重要环节。Bio-PCR是当前种子携带细菌检测的常用方法,而特异性引物的选择和使用是检测的关键。本研究使用已报道的7对引物对17株西瓜嗜酸菌、10株嗜酸菌...
核桃枝枯病小新壳梭孢巢式PCR检测方法的建立
核桃枝枯病 小新壳梭孢菌 分子检测 巢式PCR
2018/6/27
近年来, 小新壳梭孢 Neofusicoccum parvum 导致的核桃枝枯病屡有报道, 该病防治困难, 发病率高, 是核桃的一种灾难性病害。为建立 N. parvum 的快速、灵敏的分子检测体系, 根据 N. parvum 的几丁质合酶1基因(CHS1)及其前后100 bp序列, 分别设计了两对特异性引物CT-WK3-S/CT-WK3-A和CT-N-S/CT-N-A, 建立了 N. parvu...
一种改进的尖孢镰刀菌的实时荧光定量PCR检测方法
实时荧光定量PCR 土壤病原真菌 尖孢镰刀菌 检测下限
2017/11/3
为实现荧光定量PCR对土壤病原真菌数量更为高效、灵敏的检测, 本研究将液体培养的孢子悬浮液和长年耕作的水稻土制作成孢子浓度为4×101~4×106 spore/g的带菌土, 采用MoBio PowerSoil@ DNA Isolation Kit提取模拟带菌土壤总DNA, 引入常规PCR预扩增包含qPCR目标序列的1 446 bp片段, 以预PCR产物为模板进行qPCR，构建荧光定量PCR标准曲线...