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去除供者骨髓中的T淋巴细胞可有效防止移植物抗宿主病(GVHD)的发生.用含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)基因的高滴度逆转录病毒(1.5×105 CFU/ml)感染小鼠T淋巴细胞,G418筛选,获得稳定表达CD基因的T/ pCD2细胞.经PCR和RT-PCR方法检测证明CD基因已成功地导入T淋巴细胞中并有效表达.分别用不同浓度的5-FCyt作用于T/ pCD2及T淋巴细胞,光镜下观察不同时间细胞...
含血管内皮生长因子启动子驱动CD自杀基因重组腺病毒的制备及其体外杀伤作用观察
基因重组 腺病毒
2007/7/25
通过肿瘤组织特异性调控元件(启动子或增强子)以驱动自杀基因表达于特定靶细胞产生特异性杀伤作用是目前自杀基因靶向调控研究的热点[1]。血管内皮生长因子(VEGF)是血管内皮细胞特异性有丝分裂原,在肿瘤生长和转移过程中具有重要作用。几乎所有实体瘤细胞中都有过量表达,而正常组织中不表达或表达甚微[2][3],其表达水平的升高与VEGF启动子(VEGFP)活性的增强有关[4]。为研究VEGFP可否提高大肠...
新法制备含VEGF启动子驱动的CD/TK融合基因重组腺病毒
基因重组 腺病毒
2007/7/25
重组腺病毒因其感染细胞谱广、病毒滴度高、基因转移率高、较适合体内基因转移等特点已被广泛应用于恶性肿瘤的基因治疗。但无论是细胞内同源重组法还是细菌内同源重组法都存在成功率低、对操作技术和实验设备要求高等缺陷,不适合在普通实验室开展,在一定程度上限制了重组腺病毒载体的应用和发展[1][2][3][4]。本研究改进了传统的细菌内同源重组法,以简单的化学方法替代电穿孔法,先把腺病毒基因组质粒pAdEasy...