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【目的】开发一种新型的大肠杆菌表面展示系统，为C 末端截短NCgl1221 蛋白作为锚定蛋白提供科学依据，丰富并优化细菌表面展示系统。【方法】扩增C 末端截短NCgl1221 序列和β－淀粉酶基因，构建融合蛋白表达载体。将重组载体PET-NA和空载体PET-28a 分别转入Rosetta(DE3) pLysS 中，IPTG诱导表达，SDS-PAGE和Western blot鉴定融合蛋白表达情况。将...
利用pⅧ展示系统改进噬菌体抗体芯片
蛋白质芯片 噬菌体展示抗体 pⅢ展示系统 pⅧ展示系统 凝血酶特异的单链抗体
2009/11/26
将展示单链抗体的重组噬菌体与羧基终止的硅片偶联, 制成噬菌体抗体芯片, 可用于检测多类蛋白质和蛋白质组. 通常抗体被展示于噬菌体外壳蛋白pⅢ上, 由此制备的芯片灵敏度和信噪比较低. 我们选用凝血酶特异的单链抗体为代表, 比较了pⅢ展示系统和pⅧ展示系统制成芯片的检测效果. 由于pⅧ展示系统的融合蛋白拷贝数多, 所受空间位阻小, 大幅度提高了噬菌体抗体芯片的灵敏度和信噪比, 有望用于制备新型蛋白质芯...
