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本研究计划构建能同时表达牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）优势抗原基因的重组质粒并研究其免疫效果，旨在为BVD-IBR二联核酸疫苗的研制提供参考。采用PCR扩增目的基因E0及gD并将其依次连接至真核表达载体pVAX1-IRES中，构建pVAX1-E0-IRES-gD重组真核表达载体；将pVAX1-E0-IRES-gD转染至293T细胞中，间接免疫荧光法检测目的基因在细胞...
复旦大学生命科学学院甘建华课题组、李继喜课题组合作研究揭示非洲猪瘟病毒DNA连接酶的分子机制（图）
复旦大学生命科学学院 甘建华 课题组 李继喜 非洲 猪瘟病毒 DNA 连接酶 分子机制
2019/2/25
近期，复旦大学生命科学学院、遗传工程国家重点实验室甘建华课题组与李继喜课题组合作研究揭示了非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）DNA连接酶（AsfvDNAL）的分子机制，相关研究成果在线发表于《自然•通讯》(Nature Communications)。该研究用X-射线晶体学方法解析了AsfvDNAL与不同类型DNA复合物的结构，揭示了Asfv...
基因修饰的鸡新城疫病毒HN基因DNA疫苗免疫效力评价
基因修饰 NDV DNA疫苗 免疫保护
2009/11/3
为了评价基因修饰对提高DNA 疫苗免疫效果的影响，将 NDV F48E9 株HN基因进行密码子优化和信号肽替换，修饰后的基因命名为SoptiHN，将HN和SoptiHN基因分别克隆至pVAX 1和含CpGODN刺激序列的载体pVAX 1CpG中，共获得pVSoptiHN、pVCSoptiHN、pVHN和pVCHN 4种质粒。将4种质粒股四头肌多点注射3周龄SPF鸡，每只鸡200 μg，...
CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应
CpG DNA O型口蹄疫病毒 抗原 佐剂效应
2009/7/21
作者应用含CpG基序序列的重组质粒（即CpG DNA）作为免疫佐剂，评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果。 结果表明：CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠，CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应，能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体，其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍。CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪，其增强抗原诱...
检测猪圆环病毒2 型DNA 的套式PCR 方法的建立及应用
猪圆环病毒2 型 套式PCR
2009/5/4
为了进一步调查研究PVC2 的流行病学及其致病机制, 根据猪圆环病毒2 型GD 株及已发表的PCV2 的全基因组序列, 对来自广
东、广西、湖南、海南等地287 个猪场送检的1 560 个可疑病料进行PCR 扩增, 并对扩增产物进行克隆、酶切、测序鉴定, 建立了PCV2 检测的套式PCR 方法。结果表明,PCR 扩增获得了预期大小的片断, 将测序结果与GenBank 收录的PCV2 序列进行比较...
CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的乳腺炎大鼠的保护研究
乳腺炎 大鼠 模型 金黄色葡萄球菌
2008/10/22
【目的】建立金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）感染的大鼠乳腺炎模型，并观察CpG-DNA对乳腺的保护作用。【方法】18只雌鼠分3组(n=6)，产后72h分别灌注磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution，PBS）（C组）、2×105CFU•ml-1（L组）和2×1012CFU•ml-1 (H组)金葡菌到第四对乳腺内，24 h处...
表达H5亚型禽流感病毒HA基因的DNA疫苗免疫保护效力研究
禽流感病毒 血凝素基因 DNA疫苗 免疫保护效力
2008/10/20
表达高致病力禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1) [GD/1/96(H5N1)]HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA5具有良好的免疫保护性,为了将其开发并应用于实际,对其免疫保护效力进行了进一步的研究。结果表明,用10、40、70、100和150g pCIHA5和油苗1次免疫后,其免疫保护率分别为12.5%(1/8)、58.3%(7/12)、72.7%(8/11)...
【目的】探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）自杀性DNA疫苗的免疫效果。【方法】将ORF5和ORF6基因分别插入可以同时表达两个外源基因的表达载体pSCA2的26S启动子下游，获得ORF5和ORF6双基因共表达自杀性DNA疫苗pSFV-56。【结果】Western blot检测证实ORF5和ORF6基因获得正确表达，并且所表达的GP5和M蛋白可以形成异源二聚体。将pSFV-56免疫Balb/c...
猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因对猪的DNA免疫
猪繁殖与呼吸综合征病毒 DNA重组质粒 细胞因子 免疫反应
2008/8/22
【目的】检测PRRSV GP5 DNA重组质粒在猪体诱导的免疫反应以及细胞因子的佐剂效应。【方法】将表达PRRSV GP5的DNA重组质粒与表达3种细胞因子的重组质粒联合免疫SPF猪，经3次免疫后人工感染PRRSV，检测体液免疫、细胞免疫以及攻毒保护性反应。【结果】重组质粒pCI-GP5可诱导免疫猪产生中和抗体，效价达1:19.2，并可诱导机体产生较强的细胞免疫，攻毒后组织中PRRSV核酸的检出率...
将本课题组构建的共表达FMDV 衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗（pVIRIL18P1），分别以单独及混合的共3种方式接种牛，然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导牛产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中重组...