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观察转染微小 RNA-146a( miR-146a) 对大鼠肺泡巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子 -琢( TNF-琢)表达的影响,探讨转染 miR-146a 对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用。 方法 体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株 NR8383,分别以 25、50、100?nmol/L?Cy TM 3 标记的 Pre-miR TM 阴性对照转染细胞,选择转染效率最高的浓度作为实验浓度。 将 NR8383 ...
CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立
CD147 慢病毒载体 转染 增殖
2013/12/4
CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白,可促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟构建CD147慢病毒表达载体,建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系,观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 RT-PCR扩增CD147基因全长序列,将序列插入pEGFP载体,构建pEGFP-CD147慢病毒表达载体,随后转入293FT细胞中进行慢病毒包装,用获得的慢病毒毒液感染人...
观察稳定转染PGRMC1基因的小分子干扰RNA(siRNA)对卵巢癌COC1细胞体外增殖的影响。
双干扰质粒共转染对胃癌BAG-1基因亚型表达的抑制作用
胃癌 BAG-1基因 短发卡RNA 小分子干扰
2013/12/20
构建针对人BAG-1(Bcl-2-associated athanogene 1)基因的短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达质粒,探讨其对人胃癌SGC-7901细胞BAG-1主要亚型表达的抑制作用及对细胞生长的影响。
肺癌严重危害人类生命和健康,目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lung cacer, NSCLC)治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶(hTPO)基因及人钠碘转运体(hNIS)基因共转入肺癌细胞系后研究其摄碘能力的变化。方法 克隆,重组,包装并扩增纯化得到重组腺病毒(AdTPO),测定病毒滴度,Western b...
转染pCE质粒的干细胞对肝癌治疗的影响
基因治疗 干细胞 肝肿瘤 趋化因子CXCL12
2013/12/30
观察转染pCE质粒的干细胞对肝癌的治疗作用。方法 采用尾静脉直接注射法治疗大鼠肝脏转移瘤,设立阴性对照、干细胞、转染pCE质粒的干细胞组和5-Fu组,通过观察转移瘤在肝脏组织中的生长情况和卫星灶形成,肝脏组织的病理学改变,检测基质衍生因子1(stromal cell derived factor1, SDF -1) 表达,比较4组对肝癌的治疗作用。结果 转染pCE质粒的干细胞组对肿瘤细胞的生长...
IL-27基因转染对树突状细胞表型和功能的影响
白细胞介素27 树突状细胞 细胞培养 免疫活性
2013/12/27
探讨转染IL-27基因体外对人外周血单个核细胞来源树突状细胞表型和功能的影响。方法 采集健康成人外周血,密度梯度离心法获得外周血单个核细胞,用GM-CSF、IL-4诱导树突状细胞(Dendritic cell, DC),第5天后将DC分为3组:IL-27基因转染组、TNF-α组和阴性对照组。倒置显微镜观察DC形态;流式细胞术检测DC表面分子CD1a、CD80、CD83和CD86的表达情况;MTT法...
背景与目的: 观察转染recO基因对紫外线(UVB)诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)抗氧化能力及某些炎性因子分泌的影响。 材料与方法: 从抗辐射菌(deinococcus radiodurans,Dr)中克隆recO基因连接到pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO载体上并转染HSF细胞,recO转染组分别以0、30、90、120 mJ/cm2的紫外线(UVB)进行照射,同时设未转染空白组及转染空...
转染肿瘤坏死因子-α及MDR1反义RNA逆转乳腺癌多药耐药的研究
基因 多药耐药 肿瘤坏死因子 乳腺肿瘤
2009/1/4
目的:转染肿瘤坏死因子-α(TNF-α)cDNA和多药耐药基因(MDR1)的反义RNA到乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR中进行表达,并观察它们在乳腺癌耐药逆转中的作用。 方法:应用RT-PCR和DNA重组技术构建反义绿色荧光蛋白pEGFP-MDR1融合蛋白表达载体和红色荧光蛋白pDsRed2-TNF-α融合蛋白表达载体,分别和同时导入乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR中进行表达,检测转染前后细胞...
目的 研究血管抑素(angiostatin)基因转染联合化疗药物顺铂对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的协同治疗作用及其相关机制。方法 使用人卵巢癌细胞株SKOV3建立人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为4组, 分别注射空质粒PcDNA3、angiostatin/PcDNA3、化疗药物顺铂、angiostatin/PcDNA3+顺铂, 质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的腹水量及腹腔...
nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株抑制消减cDNA文库的构建
肺肿瘤 nm23-H1基因 抑制消减杂交
2013/12/10
已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因,本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础。方法 利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization, ...
Epidermal growth factor receptor (EGFR) is a transmembrane glycoprotein with relative molecular weight of 17 000, consisting of extracellular ligand binding domain, transmembrane domain and intracellu...
PTEN 表达载体的构建及转染食管鳞癌细胞系EC9706
PTEN 食管鳞癌 mTOR 转染
2014/1/7
筛选稳定表达野生型PTEN基因的食管鳞癌细胞株EC9706。方法 提取胎盘总RNA,设计引物,PCR扩增人野生型PTEN基因,经测序鉴定后,连接于pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建pcDNA3.1-PTEN,用脂质体介导的方法将其转染EC9706。而后加抗生素G418筛选稳定表达株,用RT-PCR方法检测稳定表达株PTEN基因的mRNA水平,通过绘制生长曲线观察细胞生长情况。结果 PCR产物...
nm23-H1基因转染逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型分子机制的实验研究
人高转移大细胞肺癌细胞株 基因
2013/12/11
nm23-H1是公认的肿瘤转移抑制基因。我们的前期研究结果发现nm23-H1基因可明显抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2的活性。本研究旨在探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1及外源性ERK1/2通路抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中ERK1/2及其细胞恶性生物学行为的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依...