搜索结果: 1-15 共查到“基础医学 shRNA”相关记录18条 . 查询时间(0.046 秒)
SET8-shRNA抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移
赖氨酸甲基转移酶 血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞迁移
2018/9/20
探讨赖氨酸甲基转移酶SET8对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响。 方法 体外分离培养大鼠VSMC,将VSMC随机分为正常对照组、空质粒组、SET8-shRNA组。应用RT-PCR、Western blot检测SET8和钙黏附蛋白E-cadherin mRNA和蛋白的表达,应用MTT法检测细胞增殖能力,应用Transwell实验检测细胞迁移能力。 结果 SET8-shRNA组与正常对照...
构建靶向人Ⅰ型胶原蛋白α1链（COL1A1）分子的shRNA 真核表达载体并检测其对靶分子的干扰效应。方法 根据靶分子COL1A1基因序列, 设计、合成编码其shRNA 的互补寡核苷酸序列, 克隆至线性化的pSilencerTM2.1-U6 neo载体中并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定; 脂质体介导重组质粒转染乳腺癌MDA-MB-231细胞, 经G418筛选获稳定表达细胞株, RT-PCR 及W...
探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562粒系分化的影响。方法 针对CIAPIN1基因设计并构建短发卡RNA(shRNA)真核表达载体，转染K562细胞并作为干扰组，以无关序列shRNA处理的K562细胞作为对照组。采用Real-time PCR及Western blot技术鉴定干扰效率;采用瑞氏染色和电镜分别观测K562细胞形态学和超微结构的改变;采用Real-...
慢病毒介导shRNA沉默HDAC1表达对EC109细胞生长特性的影响
HDAC1 慢病毒 食管癌细胞 细胞生长
2013/11/15
应用慢病毒介导的RNA干扰技术，有效沉默食管癌细胞株EC109的HDAC1表达并观察其对细胞生长的影响。 方法 以HDAC1为靶基因，合成寡核苷酸，退火形成双链DNA，与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCSIL-PUR载体连接获得重组慢病毒载体；将其与病毒复制包装质粒共感染293T细胞，收集并浓缩上清液获得重组病毒，测定病毒滴度；病毒颗粒转染EC109细胞，通过荧光显微镜等观...
研究慢病毒和质粒作为RNA干扰载体在沉默卵巢癌RAS同源基因家族成员A（RhoA）基因表达方面的差异。方法 分别将慢病毒及质粒载体携带的针对RhoA基因的siRNA序列感染或转染卵巢癌HO8910细胞, 经过嘌呤霉素筛选建立稳定沉默RhoA基因的细胞株。通过荧光显微镜观察、 实时荧光定量PCR、 Western blot法、 血管形成实验、 细胞划痕实验研究两种载体随着细胞培养代数的增加在抑制卵巢...
shRNA干扰沉默Mcl-1基因对淋巴瘤细胞系增殖的影响
淋巴瘤 髓细胞白血病基因-1 短发夹RNA 凋亡 慢病毒载体
2012/7/10
研究慢病毒介导的髓细胞白血病基因（Mcl-1）短发夹状RNA（shRNA）干扰对淋巴瘤细胞系SNK-6增殖和凋亡的影响。 方法 设计以Mcl-1为靶点的shRNA并构建携带此shRNA的慢病毒载体，转染淋巴瘤细胞系SNK-6，荧光定量PCR(qPCR)及Western blot方法检测病毒感染前后Mcl-1 mRNA及蛋白表达变化，四甲基偶氮唑盐法（MTT法）和流式细胞仪分析细...
丙型肝炎病毒核心蛋白抑制shRNA介导的RNA干扰作用
丙型肝炎病毒 核心蛋白 RNA干扰 抑制因子
2012/7/10
研究丙型肝炎病毒编码的蛋白对RNA干扰的抑制作用，筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。 方法 构建丙型肝炎病毒不同蛋白质的真核表达质粒，加入萤火虫荧光素酶基因的RNA干扰体系，共转染HeLa细胞，检测萤火虫荧光素酶活性以观察RNA干扰效果的变化，筛选出有作用的RNA干扰抑制因子。在针对内源性GFP的RNA干扰体系中进一步确证该种抑制作用。利用共转染方法观察该蛋白抑制RNA干扰的剂...
目的研究慢病毒介导生存素基因特异性短发夹状RNA(shRNA) 对子宫内膜异位症异位内膜生长及新生血管形成的影响。方法建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)子宫内膜异位症模型，随机分成单纯接种组、shRNA慢病毒组、空载慢病毒组和空白载体组，每组30只。通过Image-proplus软件测量新生血管面积与鸡胚尿囊膜面积比(VA/CAM) 评价沉默survivin基因对CAM血管生成的影响，TUNEL检测异位...
慢病毒介导shRNA沉默巢蛋白表达对人黑色素瘤细胞转移特性的影响
RNA干扰 人黑色素瘤 巢蛋白 迁移
2012/4/24
目的应用慢病毒介导的RNA干扰技术，有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903 巢蛋白（nestin）的表达，研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响。方法以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点，以慢病毒基因PLL3.7 作为质粒载体，构建靶向人nestin的shRNA表达质粒，另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒，分别感染UACC903细胞并流式分选获得高纯度的nestin 干扰...
Survivin shRNA重组慢病毒构建
及对A549细胞增殖的影响
慢病毒 Survivin 短发夹RNA 增殖
2013/12/5
Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein, IAP）家族的成员，在多种肿瘤组织中高度表达而在终末分化细胞中极少表达，因此可以作为癌症治疗的理想靶点。本研究旨在通过构建Survivin基因shRNA的慢病毒质粒并干扰肺癌细胞A549中Survivin的表达，分析其对细胞增殖的影响。方法 设计Survivin干扰靶序列，构建重组质粒；将pLL3.7-...
携带增强型绿色荧光蛋白基因的shRNA真核表达载体的构建
绿色荧光蛋白 基因 U521细胞
2010/2/1
目的：构建携带EGFP的shRNA真核表达载体。 方法: 应用PCR的方法从pBSK/U6质粒上扩增出U6启动子及其下游的Xbal、SalI和BamHI酶切位点，并增加NotI位点。将扩增的产物连入pEGFP-C1载体MluI位点处，构建成携带EGFP的siRNA真核表达载体。应用该载体介导针对EGFP的短发夹环RNA（pEGFP/U6/EGFP），转染U251细胞，通过荧光显微镜和流式细胞仪检测...
目的：构建含下游调控元件的拮抗分子（downstream regulatory element antagonistic modulator，DREAM）基因有效短发夹RNA(shRNA)的慢病毒载体, 利用RNA干扰技术抑制DREAM基因表达，开展对神经病理性疼痛基因治疗的实验研究。方法：将靶向大鼠DREAM基因的shRNA重组到慢病毒穿梭质粒中，将重组质粒pKCSHR-puro/GFP-DRE...
干扰Fas受体表达的串联shRNA表达载体的构建
Fas RNAi shRNA 串联质粒
2009/8/7
目的: 利用pEGFP6-1和pGenesil-1质粒构建针对Fas的2个短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA) 串联表达的载体.
方法: 设计表达2个shRNA结构的互补DNA序列, 经退火成双链, 分别克隆至带有U6启动子的质粒载体pEGFP6-1和pGenesil-1中, 构建重组质粒, 转化大肠杆菌DH5 alpha菌株, 扩增, 提取质粒, 酶切鉴定后测序分析...
目的：利用基因工程技术筛选获得阻断前列腺癌细胞株LNCaP中前列腺癌特异性膜抗原 (PSMA) 表达的shRNA序列，并构建慢病毒载体。观察转染前列腺癌细胞后对PSMA mRNA和蛋白表达的影响。方法：〖HTSS〗根据PSMA基因信息，设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对PSMA基因cds区的siRNA序列，组建shRNA对应的4对互补的单链DNA，包括siRNA的正义链和反义链；...
