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本研究计划构建能同时表达牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）优势抗原基因的重组质粒并研究其免疫效果，旨在为BVD-IBR二联核酸疫苗的研制提供参考。采用PCR扩增目的基因E0及gD并将其依次连接至真核表达载体pVAX1-IRES中，构建pVAX1-E0-IRES-gD重组真核表达载体；将pVAX1-E0-IRES-gD转染至293T细胞中，间接免疫荧光法检测目的基因在细胞...
对牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）内蒙古分离株gB、gC、gD基因进行克隆和序列测定，结果表明IBRV内蒙古分离株gB、gC、gD基因序列分别为2 850、1 723、1 559 bp，编码933、508、417个氨基酸组成的完整开放阅读框。序列比较和系统进化树分析结果显示：内蒙古分离株与其他毒株gB、gC、gD基因核苷酸序列的相似性为94.9%～99.9%，其推导的氨基酸相似性在90.3%～99...
以本实验室获得的鸭肠炎病毒(DEV) CKCE株US区基因序列(GenBank登录号EU714267)为基础PCR扩增出gD基因胞外区(gDw)，将其定向克隆至原核表达载体pET30a(+)并转化至大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLys。经IPTG诱导表达，SDSPAGE分析表明gD基因胞外区在大肠杆菌中获得与预期大小相符的表达蛋白。重组蛋白纯化后免疫家兔制备多克隆抗体，血清琼扩效价达...
对牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）内蒙古分离株gB、gC、gD基因进行克隆和序列测定，结果表明IBRV内蒙古分离株gB、gC、gD基因序列分别为2 850、1 723、1 559 bp，编码933、508、417个氨基酸组成的完整开放阅读框。序列比较和系统进化树分析结果显示：内蒙古分离株与其他毒株gB、gC、gD基因核苷酸序列的相似性为94.9%～99.9%，其推导的氨基酸相似性在90.3%～99...
鸡传染性喉气管炎病毒gD基因在重组痘病毒中表达及其免疫效力
传染性喉气管炎病毒 gD基因 重组病毒 免疫效力
2009/2/18
鸡传染性喉气管炎病毒gD基因在重组痘病毒中表达及其免疫效力。
采用逆转录病毒介导的方法，将PrV Ea株gD基因整合进PK-15细胞染色体中，建立起表达gD蛋白的细胞系PKD。通过荧光观察，发现PKD表达的gD分布在细胞膜上，具备原有的免疫反应性；同时，还发现gD蛋白在PKD细胞膜上呈明显极性分布。PCR技术和间接免疫荧光染色法对PKD进行检测的结果表明该细胞系具有良好的遗传稳定性。在相同培养条件下，PKD细胞的生长速度及形态与正常PK-15细胞无明显差异。...
牛传染性鼻气管炎病毒gD基因表达质粒免疫小鼠的试验研究
免疫小鼠 gD基因表达质粒 传染性鼻气管炎病毒 牛
2008/3/31
牛传染性鼻气管炎病毒gD基因表达质粒免疫小鼠的试验研究。