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猪类无精症缺失基因DAZL的cDNA全长克隆、组织表达和亚细胞定位
版纳微型猪近交系 类无精症缺失基因(DAZL) 基因克隆 cDNA末端快速克隆(RACE) 组织表达 亚细胞定位
2021/3/30
旨在获得猪类无精症缺失基因DAZL cDNA全长序列，阐明该基因的序列、mRNA组织表达模式、蛋白质结构特征及亚细胞定位情况。本研究以版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line，BMI）10月龄成年公猪为研究对象，屠宰收集组织样，利用RACE和RT-PCR技术获得DAZL基因cDNA全长序列；使用实时荧光定量PCR （qPCR）技术检测其mRNA多组织表达谱；在线分析蛋...
旨在克隆猪作用于RNA的腺苷脱氨酶2基因（ADAR2）全长cDNA序列，同时对该基因在猪不同组织中的表达规律进行探索。利用RACE （rapid-amplification of cDNA ends）对大白猪ADAR2基因mRNA全长序列进行克隆，并进行生物信息学分析；用荧光定量PCR方法检测35日龄大白猪心、肝、肺、肾、脾、脑、小肠、背最长肌和背部脂肪9种组织中ADAR2的表达水平。结果表明，猪...
双峰驼CYP2J cDNA全长克隆、序列信息及组织表达分析
双峰驼 CYP2J 生物信息学分析 组织表达
2019/1/16
旨在研究双峰驼CYP2J基因及其编码蛋白的结构和功能。本试验首先通过RACE和RT-PCR技术，扩增得到双峰驼CYP2J基因cDNA全长。然后利用生物信息学方法，对该基因编码的蛋白特征进行分析，并使用MEGA 6软件构建双峰驼CYP2J蛋白与相关物种CYP2J蛋白的进化树。最后利用实时荧光定量PCR测定CYP2J基因在双峰驼各组织的表达量差异。结果表明，双峰驼CYP2J基因cDNA全长为1 770...
马立克病病毒（MDV）是少数感染自然宿主后可诱发淋巴瘤的疱疹病毒之一，是研究肿瘤发生及发展的理想动物模型。目前已报道MDV可编码数十种miRNA，其中MDV-1编码的miR-M4-5p被鉴定为宿主细胞miR-155的同源物，由于miR-155与人类多种肿瘤性疾病密切相关，这意味着miR-M4-5p可能在MDV的致瘤过程中扮演重要角色。本研究旨在构建miR-M4-5p的宿主靶基因文库并进行初步鉴定。...
旨在克隆荣昌猪TMSB15A基因全长，检测该基因在荣昌猪各组织中的表达特征，并对其基因的结构与功能进行分析。本研究利用RCAE（Rapid-amplification of cDNA ends）-PCR以及RT-PCR（Real-time quantitative PCR）技术克隆荣昌猪TMSB15A基因mRNA全长序列以及检测该基因在荣昌猪各组织中的表达特征。结果表明，荣昌猪TMSB15A基因全...
Identification of predicted genes expressed differentially in pituitary gland tissue of young growing bulls revealed by cDNA-AFLP technique
Bos taurus breeds differential display gene expression Hereford Limousine polyacrylamide gel electrophoresis restriction enzymes developmental ages real time PCR
2015/6/24
Differentially expressed transcript derived fragments (TDFs) of bovine pituitary gland tissue at different developmental ages of Limousine and Hereford bulls were identified by cDNA-AFLP technique. St...
猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)是三种常见的仔猪病毒性腹泻病原，作者拟构建可同时检测三种病原的cDNA基因芯片。分别根据PEDV基因（S、M）、TGEV基因（S、N）、PoRV基因（VP7、NSP4）的保守区设计引物扩增靶基因，进行PEDV-TGEV-PoRV的cDNA阵列设计，建立了扩增标记探针的多重PCR方法，并对所构建cDNA芯片的特异性、...
旨在克隆鸡 β-防御素Gal-9 基因，对其预测的成熟肽基因进行原核表达，并对产物进行抑菌活性的检测。根据 GenBank发表的鸡β-防御素基因Gal-9（NM_001001611.2）设计引物，采用RT-PCR方法从鸡食道中扩增得到鸡β-防御素Gal-9基因，将该成熟肽基因克隆到原核表达载体pET-32a（+）的EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切位点上，构建重组原核表达质粒pET-32a-Gal-9。将...
旨在克隆绵羊Gfrα1基因序列，深入研究绵羊精原干细胞（SSCs)。本研究通过RTPCR扩增和分子克隆的方法克隆到了绵羊Gfrα1基因的编码区大部分片段。结果，克隆得到的绵羊Gfrα1基因的大部分cDNA序列长1 312 bp，包括1 311 bp的开放阅读框（ORF），编码437个氨基酸，与牛、人、黑猩猩、大鼠和小鼠相应核苷酸序列的同源性分别为98.5%、91.3 %、91.0%、88.9%和...
旨在克隆绵羊Gfrα1基因序列，深入研究绵羊精原干细胞（SSCs)。本研究通过RTPCR扩增和分子克隆的方法克隆到了绵羊Gfrα1基因的编码区大部分片段。结果，克隆得到的绵羊Gfrα1基因的大部分cDNA序列长1 312 bp，包括1 311 bp的开放阅读框（ORF），编码437个氨基酸，与牛、人、黑猩猩、大鼠和小鼠相应核苷酸序列的同源性分别为98.5%、91.3 %、91.0%、88.9%和...
湖羊Lrh-1基因cDNA序列及组织表达谱分析
湖羊 肝受体类似物-1（Lrh-1） RACE 序列分析 组织表达
2013/12/2
本研究以湖羊肝脏为材料对肝受体类似物-1（Liver receptor homolog-1, Lrh-1;NR5A2）基因序列进行RT-PCR和RACE测定，并用DNAman、Tmpred、Signal P 3.0、Expasy等生物信息学分析软件和在线工具，对Lrh-1 cDNA序列及其蛋白的理化特性、跨膜结构、信号肽和二级结构进行生物信息学分析，同时采用实时荧光定量PCR方法检测湖羊Lrh-1...
莫氏巴贝斯虫裂殖子cDNA表达文库的构建及免疫学筛选
莫斯巴贝斯虫 cDNA表达文库 免疫筛选 RACE
2013/11/29
为了构建莫氏巴贝斯虫（Babesia motasi）裂殖子cDNA表达文库，从中筛选和鉴定功能基因，利用差速离心法从莫氏巴贝斯虫感染的红细胞中纯化裂殖子，提取总RNA并纯化mRNA。在合成的双链cDNA两端加上含EcoRⅠ和Hind Ⅲ定向接头后连接到λ SCREEN载体上。通过体外包装形成完整的噬菌体颗粒，并用之转染ER1647，构建莫氏巴贝斯虫裂殖子的cDNA表达文库。用莫氏巴贝斯虫阳性血清筛...
犬弓首蛔虫雄虫cDNA文库构建及EST分析
犬弓首蛔虫 雄虫 cDNA文库 表达序列标签(EST)
2012/8/9
为构建T. canis雄虫cDNA文库，采用Trizol法提取T. canis雄虫的总RNA，合成cDNA，连接到λTripEx2载体上，通过包装蛋白对连接产物的包装，接种到大肠杆菌XL1Blue中进行原始文库和扩增文库的滴度测定。经质量鉴定表明：初始文库的滴度为5.25×106 pfu·mL－1，扩增后文库的滴度为6.90×109 pfu·mL－1。文库的插入片段大小在500~2 000 b...
雏鸭肝炎病毒侵染下肝脏消减cDNA文库的构建及差异基因筛选
雏鸭 雏鸭肝炎病毒 抑制性消减杂交 表达序列标签
2013/12/2
本研究通过构建雏鸭肝脏消减cDNA文库，旨在筛选并鉴定与雏鸭病毒性肝炎相关的基因，对相关基因进行功能聚类分析进而探究其作用机理。利用抑制性消减杂交（Suppression subtraction hybridization，SSH）技术构建3日龄健康全同胞金定鸭人工感染雏鸭肝炎病毒（Duck hepatitis virus，DHV）与同期注射等量生理盐水差异表达基因的SSHcDNA文库。对其中5...