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靶向鸭肠炎病毒NP基因RNAi对DEV增殖的影响
鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白 RNA干扰 荧光定量PCR
2017/3/14
为探究核衣壳蛋白(NP)对鸭肠炎病毒(DEV)增殖的影响，笔者根据GenBank上DEV-NP基因序列，设计并构建pSilencer-DEV-NP，采用三种不同方式处理转染鸭胚成纤维(DEF)细胞后，应用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析pSilencer-DEV-NP对DEV增殖的影响，结果显示：经荧光显微镜法观察，pSilencer-DEV-NP-l~4在DEF细胞中均呈现绿色荧光；FQ-PCR...
RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达的影响
小干扰RNA 黑素皮质素受体1基因 小鼠胚胎成纤维细胞 抑制率
2014/3/31
旨在研究RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）黑素皮质素受体1（Melanocortin-receptor，MC1R）基因表达的影响；以MC1R基因作为影响哺乳动物毛色性状的候选基因，通过RNA干扰（RNAi）技术抑制小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达。合成3对针对小鼠MEF中MC1R基因的瞬时干扰siRNA，采用反向转染法将siRNA转染入MEF，取转染siRNA 48 h后的小鼠胚胎成纤维细...
逆转录病毒载体RNAi技术抑制猪瘟病毒在猪胚胎成纤维细胞的增殖
猪瘟病毒 猪胚胎成纤维细胞 RNA干扰 逆转录病毒载体
2009/7/20
摘要:利用针对猪瘟病毒（Classical swine fever virus , CSFV）石门株Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒表达载体，转导猪胚胎成纤维细胞，在G418的筛选压力下，获得7个稳定整合shRNA表达构件的猪胚胎成纤维细胞株。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆，72h后以对感染细胞克隆的进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测，结果显示，在所获...
研究RNA干扰（RNA interference, RNAi）表达载体对UCP基因的抑制作用。针对鸡解耦联蛋白（avian uncoupling protein，avUCP）基因，构建4种RNAi质粒表达载体（分别称为A、B、C和D号载体）。再经过脂质体法转染成肌纤维，应用荧光定量PCR及流式细胞术检测其对avUCP mRNA及蛋白表达的影响。构建的4种表达载体均抑制了avUCP的mRNA及蛋白的...
本文旨在构建有效抑制朊蛋白（Prion protein，PrP）表达的重组质粒，并以此为工具控制PrP表达，从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段（shPrP），退火后与表达载体pG-super（Hairpin siRNA expressing vector）定向连接，构建重组质粒pG-super-shPrP。对重组子进行PCR鉴定，测序正确后，脂质体法...
