搜索结果: 1-15 共查到“农学 shRNA”相关记录17条 . 查询时间(0.111 秒)
旨在进一步揭示MSTN在绵羊成肌细胞中的调控机制，制备可有效失活MSTN基因的工具，为通过RNA干扰技术提高绵羊产肉量提供方法和理论依据。本研究以绵羊成肌细胞为试验材料，构建特异靶向绵羊MSTN基因的shRNA干扰质粒载体，将干扰效果好的质粒进一步包装为重组腺病毒，转染细胞后采用qRT-PCR和Western blot检测MSTN基因以及生肌调节因子和干扰素反应基因的表达。结果表明，质粒ShR21...
以矮牵牛（Petunia hybrida）自交系‘Mitchell Diploid’（MD）为材料，通过3′ RACE和5′ RACE获得了其八氢番茄红素脱氢酶基因（PhPDS）的cDNA序列，进而通过PCR扩增出编码区的基因组序列。分析结果显示，PhPDS的cDNA序列全长2 182 bp，编码区序列1 746 bp，编码582个氨基酸。推测的蛋白质序列具有类胡萝卜素脱氢酶的保守结构域特征。编码...
利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞，建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆，并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因的干扰效果。采用LR重组技术，将pENTR/U6/Nsp9-4、pENTR/U6/Nsp9-6及pENTR/U6/-CON分别与pDEST载体进行LR重组，获得表达骨架，重组后的表达载体在...
旨在构建内蒙古白绒山羊成纤维细胞生长因子Ⅴ（Fibroblast growth factor 5，FGF5）基因shRNA真核表达载体（pRNAT-shRNA）。以内蒙古白绒山羊胎儿成纤维细胞总RNA为模板，PCR扩增FGF5基因。设计并合成3条FGF5基因的靶向shRNA序列，分别插入pRNAT-U6.1/Neo载体中，构建重组干扰质粒载体pRNAT-shRNA1、pRNAT-shRNA2和pR...
水牛YY1基因克隆及其shRNA片段的筛选
水牛YY1基因 shRNA 慢病毒表达载体 基因表达
2014/3/18
本试验旨在克隆水牛阴阳因子1（YY1）基因，并筛选获得可有效抑制水牛YY1基因表达的shRNA干扰片段。以水牛成纤维细胞cDNA为模板，采用RT-PCR方法，扩增水牛YY1基因CDS序列，将其连接插入到pMD18-T载体中，进行序列测序并分析。采用Xho I和EcoR I双酶切，将水牛YY1基因编码区定向克隆至pEGFP-N1载体中，构建其真核表达载体pYY1-EGFP-N1。设计2条靶向水牛YY...
shRNA对大鼠心肌细胞牛磺酸转运体的抑制作用
H9c2细胞 RNA干扰 牛磺酸转运体 细胞增殖
2013/11/4
本试验旨在研究短发夹RNA(shRNA)对大鼠心肌细胞牛磺酸转运体(TauT)的抑制作用。根据已克隆的大鼠心肌TauT基因序列设计并构建了3个shRNAs(shRNA1#、shRNA2#、shRNA3#)及1个阴性对照shRNA表达载体,利用脂质体LipofectamineTM 2000将构建好的重组质粒shRNA1#、shRNA2#、shRNA3#及阴性对照质粒分别转染H9c2细胞,细胞分为对照...
为研究视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4, RBP4)对猪前体脂肪细胞分化的影响，笔者构建了RBP4重组慢病毒干扰载体，包装并感染猪前体脂肪细胞，采用BODIPY和油红O染色以及real-time PCR等方法，从形态学和基因表达水平检测抑制RBP4表达对成脂分化的作用。研究结果显示，RBP4重组慢病毒干扰载体构建成功，病毒滴度达到 6.5×107 pfu·mL-...
慢病毒介导的shRNA对MFC细胞生长抑素的沉默及对细胞增殖的影响
慢病毒介导 shRNA MFC细胞生长抑素 细胞增殖
2011/10/25
SS能够抑制肿瘤细胞的增殖，其与肿瘤的关系已成为肿瘤学的研究热点。本研究将包装获得的靶向生长抑素的lv-shRNA病毒液感染肿瘤细胞MFC，同时，以pcDNA3.1-SS（pSS）转染细胞组作为SS过表达细胞对照，通过荧光显微镜观察到了GFP的高效表达，RIA检测发现49.55%（P<0.05）的SS受到了抑制。MTT法绘制细胞的生长曲线可知，pSS转染细胞的生长明显受到抑制，抑制效率为8.14%...
慢病毒介导的shRNA对MFC细胞生长抑素的沉默及对细胞增殖的影响
极北鲵 东北小鲵 消化道 嗜银细胞
2011/8/25
SS能够抑制肿瘤细胞的增殖，其与肿瘤的关系已成为肿瘤学的研究热点。本研究将包装获得的靶向生长抑素的lv-shRNA病毒液感染肿瘤细胞MFC，同时，以pcDNA3.1-SS（pSS）转染细胞组作为SS过表达细胞对照，通过荧光显微镜观察到了GFP的高效表达，RIA检测发现49.55%（P<0.05）的SS受到了抑制。MTT法绘制细胞的生长曲线可知，pSS转染细胞的生长明显受到抑制，抑制效率为8.14%...
靶向狂犬病病毒N基因shRNA抑制狂犬病病毒复制的研究
狂犬病病毒 shRNA RNA干扰 实时荧光定量PCR
2013/12/6
为探讨小干扰RNA(siRNA)对狂犬病病毒（RV）复制的干扰作用，以RV N基因为靶向目标，设计合成4对编码siRNA的DNA序列，然后分别连接到载体pRNATU6.3Hygro上，转染BHK细胞，在潮霉素B抗性压力下筛选出4个阳性细胞株（BHKN1、BHKN2、BHKN3和BHKN4）。用100TCID50 CVS11毒分别感染24孔板内的上述细胞，利用Realtime RT...
靶向狂犬病病毒N基因shRNA抑制狂犬病病毒复制的研究
狂犬病病毒 shRNA RNA干扰 实时荧光定量PCR
2010/4/14
为探讨小干扰RNA(siRNA)对狂犬病病毒（RV）复制的干扰作用，以RV N基因为靶向目标，设计合成4对编码siRNA的DNA序列，然后分别连接到载体pRNATU6.3Hygro上，转染BHK细胞，在潮霉素B抗性压力下筛选出4个阳性细胞株（BHKN1、BHKN2、BHKN3和BHKN4）。用100TCID50 CVS11毒分别感染24孔板内的上述细胞，利用Realtime RT...
端粒酶RNA 亚基的shRNA 对细胞端粒酶活性影响的研究
端粒酶 端粒酶RNA shRNA
2009/6/30
[ 目的] 探讨端粒酶RNA 亚基( chTR) 的短发RNA( shRNA) shRNA 对MDCC- MSB1 细胞端粒酶活性的影响。[ 方法] 设计合成chTR
shRNA 并构建表达载体, 转染MDCC- MSB1 细胞, 应用改良TRAP 法检测端粒酶活性。[ 结果] 与对照组相比, 转染24 h 后, 各组端粒酶活性变化不明显; 转染48 h 后, 端粒酶活性均显著地下降, 且针对模...
对筛选的转录猪瘟病毒石门株3′-UTR shRNA的PK-15细胞株P-1（114~132位）、P-2（136~154位）和P-3（209~227位）分别接种猪瘟病毒（CSFV），在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测CSFV NS3基因及β-actin基因，以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果；接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验（...
M蛋白基因shRNA抑制PRRSV在Marc145细胞中复制的研究
PRRSV RNA 干扰 M 蛋白基因
2008/10/27
【目的】通过靶向PRRSV基因组中的M基因的siRNA来抑制PRRSV在Marc145细胞中的复制。【方法】构建4个能转录小发夹RNA（shRNA）的质粒，将其与靶蛋白表达质粒共转染HEK293A细胞，观察荧光或进行半定量PCR；或将其转染Marc145细胞，感染PRRSV后进行IFA、TCID50和实时PCR检测。【结果】shRNA表达质粒对M融合蛋白表达的抑制率约为50％，使M真核质粒表达蛋白...
