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2024年4月22日,上海科技大学生命科学与技术学院周智课题组与上海市第一人民医院男科李铮主任团队、中国科学院上海高等研究院王晨琛团队在衰老领域期刊《自然·衰老》(Nature Aging)上发表了题为“Targeting dysregulated phago-/auto- lysosomes in Sertoli cells to ameliorate late-onset hypogonadi...
遗传与发育生物学研究所泛素连接酶调控脱落酸信号转导研究取得进展
遗传与发育生物学研究所 泛素 酶 调控脱落 酸 信号转导
2011/4/29
脱落酸在植物对逆境胁迫应答反应方面起重要调控作用,关于其信号转导途径的研究对深入认识植物适应性生长的基本规律和植物抗逆性育种具有重要意义。
继2009年报道了E3泛素连接酶RHA2a的生理功能之后,中科院遗传与发育生物学研究所李传友实验室和谢旗实验室合作,发现拟南芥E3泛素连接酶RHA2b与RHA2a类似,在脱落酸信号转导途径中起重要作用。RHA2b与RHA2a在氨基酸水平具有较高的同源性(65...
根据端粒酶含有蛋白质组分和RNA组分的特点,采用寡核苷酸亲和纯化法从HeLa细胞蛋白粗提物中分离纯化人类端粒酶,纯化产物以TRAP法检测其延伸端粒活性,并采用RNA印迹法进行鉴定,然后从纯化产物中分离蛋白质组分,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其蛋白质亚基成分,可见到4种蛋白质亚基成分,与蛋白质分子质量标准比较,有两条位置接近212.2 ku,一条接近116.0 ku,一条接近42.7 ku.结果...
摘要用615小鼠肝RNA聚合酶B免疫母鸡获得了抗血清。在免疫扩散实验中,这种抗血清和615小鼠肝RNA聚合酶B之间形成清晰的沉淀线;与L615(可移植性小鼠白血病)小鼠及大鼠肝RNA聚合酶B之间形成弱的沉淀线;而与615小鼠肝RNA聚合酶A和C以及大肠杆菌RNA聚合酶之间不形成沉淀线。这种抗血甭对615小鼠肝RNA聚合酶B离体转录活性有明显的抑制作用,而对大肠杆菌的RNA聚合酶没有抑制作用。在免疫...
摘要本文比较了白血病615(L615)和正常615小鼠肝细胞RNA聚合酶B的免疫学特性。在免疫扩散实验中,抗615B酶抗血清和抗L615B酶抗血清分别对615B酶和L615B酶的离体转录活性有明显抑制作用,但两种抗血 分别对对其对应的酶抑制作用强。用抗615B酶抗血清的IgG分别与两种B酶进行免疫沉淀反应,它们的沉淀物凝胶电泳图谱显示能发生特异性结合反应。IgG与615B酶的沉淀物电泳图中存在着一...
一个陆地棉羧基末端蛋白酶cDNA的克隆及其表达分析
陆地棉 羧基末端蛋白酶 表达特性
2008/1/30
摘要利用PCR筛选方法从陆地棉纤维cDNA文库中分离出1个基因序列,命名为GhCtp。该cDNA全长1 917 bp,编码1个含473个氨基酸残基的多肽。GhCtp蛋白与拟南芥和水稻中的一类羧基末端蛋白酶具有较高的同源性,在GhCtp的N-末端有1个精氨酸富集区,而C-末端有1个Pfam数据库中编号为DUF239的高度保守区域;该蛋白的N-末端还存在1个在拟南芥和水稻羧基蛋白酶中所缺乏的ATP/G...
水稻葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA的电子克隆
水稻 电子克隆 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 RT-PCR
2008/1/29
摘要电子克隆是基因克隆的新策略.以小麦胞质葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA (Tagpdl克隆)序列为信息探针,在GenBank水稻nr数据库中找到高度同源的水稻基因组序列,通过人工序列拼接及RT-PCR确认得到了水稻该基因的全长cDNA序列,命名为OsG6PDH.OsG6PDH与小麦Tagpdl克隆的DNA一致率为88%,推导的氨基酸序列与小麦、番茄、烟草的胞质葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的一致率分...
摘要报道了人肝脏中一种新的NRDR剪接体(NRDR short isoform, NRDRiso)cDNA的发现与克隆。在用RT-PCR法局部扩增人与小鼠肝脏635 bp的NRDR DNA时,在人肝中发现了另一短序列PCR产物,克隆后测序显示其整个序列与NRDR cDNA编码区的前后序列完全一致。采用3′-Race和5′-Race方法,从人肝组织细胞中扩增得到两个全长cDNA,除1261 bp的N...
番茄GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶cDNA的克隆、表达及定位
番茄 GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶 分子克隆 基因表达 定位
2008/1/23
GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶催化GDP-D-甘露糖的合成,是植物抗坏血酸生物合成途径中上游的关键酶。以马铃薯GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶cDNA序列为信息探针,在GenBank dbEST数据库中找到65条高度同源的番茄EST序列,通过序列拼接及RACE-PCR得到了番茄该基因的全长cDNA序列,命名为LeGMP。LeGMP 与马铃薯GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶cDNA序列一致率为96%,推导的氨...
cosmid克隆的线性化用λcos末端酶来完成,线性的cosmid或λDNA经部份限制性内切酶酶解 后,分别与已标记的cos顺序探针杂交(探针为分别与λ的左端或右端的顺序互补的12核苷酸 单链片段),杂交后的部份酶解片段经电泳分离和自显影后,酶切点位置可直接在x-底片上 读出。在本实验室条件下,可一次完成二个克隆包括5-6种限制性内切酶的图谱分析,分析 和作图可通过计算机或手工进行。
摘要姐妹染色单体的分离是一精确时空调控事件,分离的紊乱会造成遗传物质传递的不稳定,从而可能引起严重的后果—细胞或个体的死亡或病态。在真核生物细胞中,一种比较保守的机制调控着姐妹染色单体的分离:随DNA复制过程建立由黏合素维持的姐妹染色单体的结合,在有丝分裂中期向后期转变过程中,随保全素的降解,分离酶发挥活性,裂解黏合素一个亚单位,促成黏合素蛋白质复合体的解离和姐妹染色单体的分离。Abstract:...
西方蜜蜂六个亚种苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异
西方蜜蜂 苹果酸脱氢酶 基因 遗传差异
2007/8/5
题目:西方蜜蜂六个亚种苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异
作者:刘艳荷1,陈盛禄1*,童富淡2,张传溪1
摘要:研究了西方蜜蜂Apis mellifera 6亚种-浙农大1号意蜂(ZND A. m. ligustica)、东北黑蜂(A. m. ssp.)、卡尼鄂拉蜂(A. m. carnica)、喀尔巴阡蜂(A. m. carpatica)、高加索蜂(A. m. caucasica)和乌克兰蜂(A. ...
小菜蛾乙酰胆碱酯酶cDNA片段的克隆和序列分析
小菜蛾 乙酰胆碱酯酶基因 反转录多聚酶链式反应 序列分析
2007/8/5
题目:小菜蛾乙酰胆碱酯酶cDNA片段的克隆和序列分析
作者:王建军1,2, 韩召军1, 王荫长1
摘要:利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法对小菜蛾Plutella xylostella的乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段进行了克隆和序列分析。通过简并性上游引物和下游引物扩增出了小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因281bp的cDNA片段。同源性分析表明, 该cDNA片段与其它昆虫乙酰胆碱酯酶基因序列具...
题目:粉纹夜蛾类Cry1Ac受体氨肽酶N cDNA片段的克隆与分析
作者:蒋才富,刘凯于,彭蓉,彭建新,洪华珠
摘要:设计简并引物,采用RT-PCR方法对粉纹夜蛾Trichoplusia ni (Hübner)细胞系BTI-TN5B-4的氨肽酶N (aminopeptidase N, APN)基因cDNA片段进行了克隆和序列分析, 通过两对引物扩增出了两种氨肽酶N基因的cDNA片段, 大小分别为...
赤点石斑鱼两种芳香化酶cDNA的克隆及其表达的组织特异性
2007/8/5
题目:赤点石斑鱼两种芳香化酶cDNA的克隆及其表达的组织特异性
作者:李广丽1,2 刘晓春1 张 勇1 贝锦新1 林浩然1*
1.山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广州5102752.湛江海洋大学水产学院,广东湛江524025
摘要:以赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)脑垂体中提取的RNA为模板,根据芳香化酶的保守序列设计引物,利用GeneR...