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应用酶标记葡萄球菌A蛋白“ELISA”检测猪囊虫抗体的研究。
用完整菌体作抗原包被进行ELISA检测激光照射前后血清抗体含量的初步研究。
用ELISA和PCR对猪、牛血清中HBV抗原、抗体及DNA的检测。
单抗捕获ELISA法检测禽多杀性巴氏杆菌特异性IgM抗体。
利用鹅细小病毒（GPV）VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125 μg/mL，其中间接-ELISA 100 μL/孔、Dot-ELISA 5 μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1∶200，检测血清的最适稀释度是1∶400，阳性判定标准为OD492≥0.20，且P/N≥2.0...
本研究旨在通过建立检测羊细粒棘球蚴病抗体的间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，为羊细粒棘球蚴病的检测提供快速、简便的手段。作者利用DNAStar软件对GenBank上发表的细粒棘球蚴EG95蛋白的氨基酸序列进行分析，筛选出高度亲水的优势表位区EG95s，对该区域编码基因进行克隆并表达。以纯化的重组融合蛋白为包被抗原，按常规方法建立检测羊细粒棘球蚴病抗体的间接ELISA，并对各种条件进行优化。S...
本试验旨在建立有效的针对猪戊型肝炎病毒（HEV）的诊断技术及试剂盒。作者建立了应用猪HEV ORF3筛选出来的一段序列合成肽swHEV11检测 HEV血清抗体的间接ELISA诊断方法，确定的抗原最适包被浓度为3 μg·mL-1；血清最适稀释度为1∶10，作用时间为30 min；酶标抗体最适稀释度为1∶12 000，作用时间为60 min。用HEV ORF3合成肽swHEV11研制的猪HEV ELI...
猪肺炎支原体P46基因的原核表达与间接ELISA方法的建立
猪肺炎支原体 P46蛋白 原核表达 ELISA
2013/12/2
猪肺炎支原体是猪喘气病的病原体，本研究选择猪肺炎支原体P46膜蛋白基因亲水区序列进行克隆，并将其内3个编码Trp的TGA突变成TGG，然后再克隆到pET28a(+)载体中，在大肠杆菌BL21（DE3）细胞内实现了高效表达，表达产物相对分子质量约为31 ku，约占菌体总蛋白35%，表达形式为包涵体，通过Western blotting证明表达产物与猪肺炎支原体高免血清具有很好的反应原性和特异性。将大...
猪嗜血支原体酶标单抗阻断ELISA检测方法的建立
猪嗜血支原体 MSG1蛋白 酶标 阻断ELISA
2013/12/3
为确定猪嗜血支原体（M. suis）在临床的感染情况和进行流行病学调查提供检测方法，本研究以纯化的猪嗜血支原体重组MSG1蛋白和辣根过氧化酶标记的MSG1蛋白单抗建立了检测猪嗜血支原体的阻断ELISA方法。经筛选确定，抗原最佳包被浓度为0.5 μg·mL-1，待检血清最佳稀释度为1∶1，作用时间为37 ℃ 1.5 h，酶标单抗最佳稀释度为1∶10 000，作用时间为37 ℃ 1 h。通过对100份...
本研究旨在建立基于真核表达的小反刍兽疫病毒（PPRV） N蛋白的诊断小反刍兽疫的间接ELISA方法。利用Bac-to-Bac杆状病毒昆虫表达系统，构建含有PPRV N基因的重组供体质粒pFastBacHTA-N，转化E.coli DH10Bac感受态细胞，得到重组穿梭质粒pBacmidPPRV-V，转染昆虫细胞Sf21，获得含有PPRV N基因的重组杆状病毒。用重组病毒感染昆虫细胞后，SDS-...
马流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立
马流感病毒 多克隆抗体 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
2013/12/3
为建立一种快速、有效的检测马流感病毒(Equine influenza virus，EIV)的方法，以EIV中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)制备的多克隆抗体为捕获抗体，原核表达的核蛋白（NP）制备的单克隆抗体为检测抗体，在国内首次建立了检测EIV的双抗体夹心ELISA方法。用该检测方法分别检测EIV、马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型和马乙型脑炎病毒阳性样品。结果表明，该ELIS...
从持续感染牛白血病病毒（BLV）的羊胎肾细胞（FLK-BLV）中提取前病毒DNA，用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env（gp51）基因，序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒，转化BL21（DE3）进行诱导表达，SDSPAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000，Western-blot结果表...
用大肠杆菌表达的FMDV NSP 3ABC经纯化复性后作为抗原，建立了鉴别感染动物与注苗动物的间接ELISA方法。用该方法检测了大量的牛血清样品，确定了3ABC－I－ELISA判定标准。3ABC－I－ELISA以（OD样品－OD阴性）÷（OD阳性－OD阴性）来计算待测样品效价。当效价小于0.2为阴性，介于0.2～0.3之间为可疑，大于0.3为阳性。根据此判定标准所测试验感染动物血清都为阳性，敏感性...