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猪水疱病自杀性DNA疫苗的初步研究
猪水疱病病毒(SVDV) 甲病毒复制子载体 自杀性DNA疫苗
2008/4/9
利用RT-PCR技术,用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因,克隆于DNA复制子载体pSCA1中,获得重组质粒pSCA/1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞,RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示,猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免疫试验表明,自杀性DNA疫苗pSCA/1BCD可诱导SVDV特异性抗体和T淋巴细胞增殖。
鸡微卫星DNA标记与肉品质性状关系研究
鸡 微卫星 肉品质性状 相关分析
2008/4/8
利用25个微卫星标记,对以隐性白羽鸡和仙居鸡为亲本建立的资源群体F2500 只鸡进行遗传检测,并测定各个体的鸡肉pH值、失水率、嫩度和肌间脂肪含量,采用方差分析法对标记与性状进行相关分析。结果表明:各位点平均等位基因数为5,平均杂合度为0.701 2,平均多态信息含量为0.646 8。嫩度间与pH值存在显著的正相关(P<0.05),与肌间脂肪存在极显著的正相关(P<0.01),与失水率之间存在显著...
DNA甲基化差异对猪生长性状的影响
甲基敏感扩增多态性 个体甲基化百分差异 生长性状 猪
2008/4/8
测定和计算了大白×梅山F1个体180日龄活重、料肉比、日增重、90 kg日龄、相对生长率和(KR)Kleiber 5个性状,应用甲基敏感扩增多态技术(MSAP)分析了DNA甲基化与以上生长性状的关系。共扩增出1 274个位点,其中在252个多态性位点中,有81个甲基化位点对生产性状产生显著的影响。整体上,亲子代间甲基化差异不显著。但是,经配对数据t检验分析,每对引物在亲子代间扩增的带数表现出一定的...
PRRS-CSF-PCV2诊断DNA芯片构建研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 DNA芯片 诊断
2008/4/1
本研究旨在研制CSF-PRRS-PCV2诊断DNA芯片。根据各病毒序列选取靶标,制备相应探针,并构建DNA芯片。结果表明:该芯片能同时检测PRRS、CSF和PCV2感染,并能区分PRRSV欧洲型和美洲型毒株,芯片检测阳性判读标准为SNR≥1.5(信号总强度模式量化)或信号强度≥1 000(信号中位值模式量化)。该芯片具有特异性高、灵敏度高和可重复利用的优点。应用PRRS-CSF-PCV2诊断DNA...
禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究
DNA疫苗免疫效 壳聚糖 脂质体 禽传染性支气管炎
2008/3/31
将制备的禽传染性支气管炎脂质体/DNA疫苗和壳聚糖/DNA疫苗,分别以肌肉注射(i.m)和滴鼻、点眼(i.n)两种途径免疫健康雏鸡,以裸DNA疫苗为对照,采用流式细胞仪(FACS)及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4+、CD8+ T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测,并于免疫后35 d进行攻毒,结果显示:(1)CD4+T淋巴细胞数,所有试验组在免疫后1~3周左右均高于对...
为构建免疫调节型DNA疫苗,将山羊IL2基因分别与捻转血矛线虫H11-1、H11-2和H11-3基因串联构建融合表达载体pcDNA/IL-2-H11-1、pcDNA/IL-2-H11-2和pcDNA/IL-2-H11-3。为检测疫苗在山羊体内的表达情况,将纯化的疫苗质粒肌肉注射山羊后取注射部位肌肉组织,于首次免疫7 d后和二次免疫10 d后分别用RT-PCR和Western Blot等方法检测H...
将本课题组构建的共表达FMDV 衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗(pVIRIL18P1),分别以单独及混合的共3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导牛产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中重组...
根据普通牛线粒体DNA序列设计引物,获得了九龙牦牛线粒体D-loop区全序列,并以羊亚科绵羊属绵羊作为外类群利用D-loop区序列对牛亚科代表性物种(牦牛、野牦牛、普通牛、瘤牛、美洲野牛、欧洲野牛和亚洲水牛)进行了系统发育分析。结果发现:牦牛线粒体DNA D-loop区序列全长893 bp,与普通牛源序列的同源性为87.4%,其中有17个碱基的缺失;在牛亚科内,牦牛、野牦牛与美洲野牛(美洲野牛属)...
不同纤维素水平对瘤胃微生物分离获得率及DNA提取率的影响
纤维素 瘤胃微生物 分离获得率 DNA提取率
2008/3/28
以3只瘘管山羊为瘤胃液供体,研究体外培养条件下不同纤维素水平底物对微生物的分离获得率及DNA提取率的影响。底物可溶性淀粉与纯纤维素比例设计为:100∶0,70∶30,50∶50,30∶70,0∶100。结果表明:总微生物分离获得率与DNA提取率随底物纤维素含量的增加,总体上呈现下降趋势;分离获得率为53.29%,总微生物DNA提取率为51.0%;细菌DNA的提取率(45.4%)显著低于原虫DNA的...
对H5亚型禽流感DNA疫苗质粒pCAGGoptiHA5的免疫效果进行了研究。pCAGGoptiHA5分别以100和10 μg剂量一次或两次免疫3周龄SPF鸡,首次免疫后4周以同样剂量和途径进行第二次免疫,一次免疫后4周、两次免疫后2周分别用100LD50的HPAIV /Goose/GuangDong/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7天采集喉头及泄殖...